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目的:阿尔茨海默病(Alzheimers disease，AD)是一种常见的进行性的神经性病变。AD病因复杂多样，脑内Aβ异常聚积被认为是AD发生发展的关键因素。研究发现脑内注射神经营养因子受体p75NTR(p75 neurotrophin receptor，p75NTR)可明显减少Aβ斑块沉积。同时也有文献报道p75NTR可以通过其胞外段与影响Aβ聚合能力和神经毒性的主要区域（第25-35位氨基酸）结合，发挥抑制Aβ聚集、促进Aβ纤维解聚，有效拮抗Aβ神经毒性，保护神经元的作用。另有研究显示p75NTR与Aβ结合后可通过激活NF-κB p65蛋白促进细胞存活，保护神经元。有研究表明p75NTR在AD脑内的表达减少。提示上调p75NTR在AD中的表达水平可能通过激活p65蛋白而达到保护神经元作用。p75NTR基因的转录调控与组蛋白乙酰化有关，而组蛋白乙酰化水平可通过组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases，HDACs)调节。人类中HDACs共有18个亚型(HDAC1-11，SIRT1-7)。已有研究表明在神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中HDAC1可抑制p75NTR转录。HDAC2与HDAC1高度同源，且HDAC2参与AD的发生发展。然而，在AD中HDAC1、HDAC2是否调控p75NTR表达未见报道。脂肪代谢的中间产物β羟丁酸(β-hydroxybutyrate，βOHB)对AD等神经退行性疾病的神经保护作用日益受到关注。βOHB是一种内源性HDACs抑制剂，具有抑制包括HDAC1/2在内的HDACs作用。但βOHB在AD中是否可通过抑制HDAC1和（或）HDAC2而调控p75NTR表达尚不清楚。综上，本研究采用Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞作为AD的细胞模型，探讨βOHB是否通过抑制AD模型细胞HDAC1/2而上调p75NTR的表达，进而激活p65蛋白，达到保护神经元的作用。 研究方法:1、细胞培养:SH-SY5Y细胞以含10％胎牛血清1640培养液于37℃、5％ CO2及饱和湿度条件下培养。待细胞生长至融合状态时以0.25％胰蛋白酶消化，制成单细胞悬液供试。2、细胞活力测定:βOHB干预组细胞以终浓度为5 mMβOHB预处理3h，再向Aβ处理组和βOHB干预组细胞加入Aβ(终浓度为10、20、40、80μM)，同时设立空白组（加入不含细胞的培养液）和对照组（加入含细胞的培养液），培养24 h，采用MTT法测定各组细胞活力。3、细胞mRNA及蛋白表达水平检测:实验分为对照组、单纯βOHB组、Aβ处理组和βOHB干预组。单纯βOHB组、βOHB干预组细胞以5 mMβOHB预处理3h，再向Aβ处理组和βOHB干预组细胞加入终浓度为20μM Aβ的培养液，对照组细胞仅加入培养液，培养6h、24 h，收集细胞。采用qRT-PCR及Western Blot法测定各组细胞p75NTR、HDAC1/2 mRNA及其蛋白表达水平，以及p65蛋白表达水平。4、沉默HDAC1/2基因的细胞p75NTR表达水平检测:将siRNA-HDAC1/2转染至SH-SY5Y细胞，同时设立阴性对照组(NonspecificsiRNA)，于转染后24 h，采用qRT-PCR及Western Blot法判定siRNA干扰效果，同时检测p75NTR mRNA及蛋白表达水平。5、统计分析:应用SPSS20.0统计软件建立数据库，进行数据分析。 结果:1、随着Aβ浓度的不断增加，细胞活力逐渐下降，40μM、80μMAβ处理组的细胞活力明显低于对照组（P＜0.01）;与40μM、80μM Aβ处理组相比，βOHB干预组细胞活力明显升高(P＜0.01)。2、与对照组相比，6h、24 h单纯βOHB组细胞p75NTR mRNA及蛋白表达水平上升（P＜0.05或P＜0.01），Aβ处理组细胞p75NTR mRNA及蛋白表达水平下降（P＜0.01）;6h、24 hβOHB干预组细胞p75NTR mRNA及蛋白表达水平高于Aβ处理组(P＜0.01)。3、与对照组相比，6h单纯βOHB组细胞HDAC1/2 mRNA及蛋白表达水平下降（P＜0.05或P＜0.01），6h、24 h Aβ处理组细胞HDAC1/2 mRNA及蛋白表达水平上升（P＜0.01）;6h、24 hβOHB干预组细胞HDAC1/2 mRNA及蛋白表达水平低于Aβ处理组（P＜0.05或P＜0.01）。4、与对照组相比，6h、24 h单纯βOHB组细胞p65蛋白表达水平升高(P＜0.01)，Aβ处理组细胞p65蛋白表达水平下降（P＜0.01）;6h、24 hβOHB干预组细胞p65蛋白表达水平高于Aβ处理组(P＜0.01)。5、与对照组相比，沉默HDAC1基因的细胞p75NTR mRNA及蛋白表达水平明显升高(P＜0.05或P＜0.01)，沉默HDAC2基因的细胞p75NTR mRNA及蛋白表达水平未见统计学差异(P＞0.05）。 结论:1、βOHB可明显抑制Aβ诱导的SH-SY5Y细胞活力下降。2、Aβ处理的SH-SY5Y细胞p75NTR mRNA及蛋白表达水平降低，HDAC1/2 mRNA及其蛋白表达水平升高，p65蛋白表达水平降低;βOHB可对Aβ所致的上述改变均具有明显的改善作用。3、βOHB可通过抑制HDAC1而上调P75NTR表达。