【摘 要】
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耐盐真菌是极端微生物的一个类群,由于它们具有独特的基因类型,特殊的生理机制和特殊的代谢产物,因此具有非常重要的研究与应用价值。近年来对于耐盐真菌次生代谢产物的研究
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耐盐真菌是极端微生物的一个类群,由于它们具有独特的基因类型,特殊的生理机制和特殊的代谢产物,因此具有非常重要的研究与应用价值。近年来对于耐盐真菌次生代谢产物的研究越来越多,研究人员从耐盐真菌的次生代谢产物中分离到了很多的新化合物,其中很大一部分的化合物都具有抗肿瘤或抑菌活性,同时也有很多的研究都表明了盐胁迫能够改变耐盐真菌次生代谢产物的化学多样性。为了探索高盐环境下真菌次生代谢产物的多样性以及新颖性,本文选取8株分离自昆明盐矿且经过初筛的真菌作为研究材料。首先用不同盐浓度(0%NaCl、3%NaCl、10%NaCl、2%NaBr)的马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB)对8株盐矿真菌进行了液体发酵的筛选,以TLC和HPLC为指导,筛选出了TLC条带较为丰富、在不同的盐浓度下菌株形态有明显差异的5株菌株进行复筛。对这5株菌的液体发酵产物进行正相硅胶、凝胶分段,以及TLC与HPLC分析,选出代谢产物丰富度较好,极性分布适中的菌株4-92进行放大发酵。通过对菌株4-92进行发酵条件优化,确定该菌株放大发酵的盐浓度及发酵时间。最后确定将菌株4-92分别用PDB和PDB加15%1NaCl液体发酵60L和200L,分别得到提取物77.4g和55.1g。在TLC及HPLC化学分析指导下,通过正相硅胶柱层析、凝胶柱层析、高效液相色谱制备等分离纯化技术,从菌株4-92的发酵产物中分离纯化得到35个化合物,鉴定了18个化合物,其中有3个新化合物。从菌株4-92高盐液体发酵(PDB+15%NaCl)提取物中分离得到23个化合物,鉴定了13个,其中有2个新化合物,主要为酚、甾醇、核苷等结构类型。从菌株4-92无盐液体发酵提取物中分离得到12个化合物,鉴定了5个,其中LTT-36为新化合物,是α,β-不饱和γ-内酯的衍生物。
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