【摘 要】
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目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与5-FU对人结肠癌细胞株HT-29生长的影响及可能的作用机制。方法:采用不同浓度EGCG和(或)5-FU处理结肠癌HT-29细胞后,四氮唑盐(MTT)
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目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与5-FU对人结肠癌细胞株HT-29生长的影响及可能的作用机制。方法:采用不同浓度EGCG和(或)5-FU处理结肠癌HT-29细胞后,四氮唑盐(MTT)法观察其对细胞生长的影响,流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡和细胞周期的变化,免疫印迹法(Western Blot)检测ERK、Akt蛋白及凋亡因子bcl-2、bax蛋白的表达。结果:(1)MTT法显示EGCG、5-FU可明显抑制HT-29细胞的生长,随着浓度的增加和作用时间的延长,抑制作用明显增强(P<0.05),EGCG与5-FU联合用药比单用EGCG或5-FU抑制效果更明显(P<0.05)。(2)流式细胞术检测HT-29细胞经EGCG、5-FU作用48小时后,细胞有明显凋亡,细胞周期G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降(P<0.05),EGCG与5-FU联合用药细胞凋亡率增加更明显(P<0.05)。同时,细胞周期G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降更明显(P<0.05)。(3)Western Blot检测显示EGCG、5-FU干预HT-29细胞48h后细胞中的磷酸化ERK(p-ERK)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白及抗凋亡因子bcl-2蛋白表达下降,促凋亡因子bax蛋白表达升高(P<0.05),联合用药同样具有协同效应(P<0.05)。结论:(1)EGCG或5-FU单用可抑制结肠癌HT-29细胞的生长,且呈时间和剂量依赖性;两者联合应用具有协同效应。(2)EGCG与5-FU协同抗结肠癌作用的可能机制是抑制ERK和Akt信号传导通路,下调bcl-2蛋白表达,上调bax蛋白表达。从而阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡。
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