极端嗜热古菌-芝田硫化叶菌DNA解旋酶的分离纯化和性质研究

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采用Q Seogarose离子交换层析、磷酸纤维素P11吸附层析、Heparin Agarose吸附层 析、Superdex 200凝胶过滤和Phenyl Superose疏水析等步骤,从嗜酸热芝田硫化叶菌细胞 裂解液中分离纯化一个DNA解旋酶.该解旋酶具有受DNA激活的ATP酶活性.根据SDS-PAGE测 定结果,该酶的分子量约为63 KDa.芝田硫化叶菌DNA解旋酶可以解开底物上70-bp的双链区,其解旋活性依赖于双链区旁的单链分叉.该解旋酶的活性依赖于Mg<2+>和ATP的水解,在NaCl浓度超过200mM受到抑制.该酶的最适pH在6.2-7.2之间.该酶在40℃-80℃之间均有活 性,70℃时活性最高.芝田硫化叶菌DNA解旋酶是从古菌中分离得到的第一个天然DNA解旋酶.
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