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金黄色葡萄球菌(SA)是导致脓疱疮的主要致病菌之一,鼻前庭又是其定植的大本营。鼻腔SA携带与金葡菌感染性疾病的发生可能存在一定的联系。随着多重耐药的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的出现,鼻腔MRSA携带可能会成为人类健康新的威胁。葡萄球菌蛋白A(SPA)是存在于大多数金黄色葡萄球菌细胞壁的一种表面蛋白。因其编码基因spa的部分序列片段具有高度的多态性而被用于SA的基因分型,成为研究SA的重要生物学工具之一。
目的:了解北京儿童医院门诊脓疱疮及正常对照儿童鼻腔携带金黄色葡萄球菌的流行病学情况、耐药性、spa分型以及菌株间的基因相关性,并进一步深入了解spa基因片段长度与细菌毒力的关系。
方法:
(1)采集北京儿童医院门诊2005年8月-2006年11月间来源于社区的脓疱疮患儿鼻腔和皮损以及非脓疱疮健康对照儿童鼻腔的SA,使用统计软件SPSS11.5做鼻腔携带率及相关信息的流行病学调查统计。
(2)根据2006年临床和实验室标准协会(CLSI)规定的琼脂稀释法对从中选取的88株SA进行药敏检测,并对比同一患者鼻腔与皮损分离SA的耐药性差异。
(3)对这88株SA的spa特定基因进行扩增,使用www.spaserver.ridom.de等专业网站对spa测序结果进行分析,研究鼻腔与皮损分离株的同源性及spa扩增序列大小与细菌毒力的关系。
结果:
(1)被调查儿童263人中,脓疱疮患儿鼻腔分离阳性率78.3﹪,健康对照儿童分离阳性率为21.0﹪。鼻腔SA分离阳性者年龄主要集中在1至6岁。皮损初发于面部和皮损初发于其它部位的患者之间鼻腔SA携带率有显著统计学差异,性别、脓疱疮类型与SA鼻腔携带没有明显统计学关系。
(2)药敏实验的88菌株对头孢唑啉、头孢曲松、头孢呋新、苯唑西林和万古霉素均敏感,对照儿童鼻腔、脓疱疮患儿皮损与鼻腔三组菌株间耐药特性无明显统计学差异。
(3)spa分型结果显示,30位脓疱疮患儿鼻腔和皮损菌株对比中,有26位具有相同的spa分型。健康对照组鼻腔SA的spa序列比脓疱疮组鼻腔和皮损SA.包含了更多的型别,分别是19、12和11种型别,其中有9型仅存在于脓疱疮组。脓疱疮组皮损的SA分离株spa基因序列长度比健康携带者短得多。
结论:
(1)脓疱疮患儿鼻腔金黄色葡萄球菌携带率明显高于健康对照儿童。
(2)88株菌均为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌,药敏实验作为分型工具时,其分辨力较低。
(3)患者皮损和鼻腔分离的SA之间存在很大的同源性,鼻腔SA携带与脓疱疮的发生可能存在着密切的联系。spa扩增序列长度越短菌株毒力越强。