异种羊ADM与自体微粒皮复合移植后的转归与免疫反应研究

来源 :内蒙古医学院 内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:akufar
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目的:自制异种羊脱细胞真皮(ADM),观察异种羊ADM与家兔自体微粒皮复合移植后远期的组织学转归、创面收缩率的变化,并利用酶联免疫法检测复合移植前后兔血清中白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的水平,对羊ADM异种移植后的免疫原性作出评价。为今后羊ADM应用于临床实验提供较为可靠的理论依据。方法:用0.25%胰蛋白酶和0.5%曲拉通(TritonX—100)溶液联合脱细胞法制备异种脱细胞真皮基质。以家兔为动物模型,侧腹部做5cm×4cm全层皮肤缺损,分别用羊ADM+自体微粒皮+异体皮(实验组),自体微粒皮+异体皮(对照组)覆盖,术后2、4、8、16、24周取样做HE染色,观察羊ADM在体内的变化和转归。并在术前1周和术后1、2、3、4、8、12、16、20、24周取兔血清,用酶联免疫法检测对比移植前后各组样本血清中IL-4和IFN-r变化规律。在术后第2、4、8、12、16、20、24周检测创面收缩率,对羊ADM异种移植后的效果作出评价。结果:(1)通过实验可成功制备出异种羊ADM,脱细胞异种真皮的镜下观察可见基质中的表皮及各种细胞成分已经完全去除,胶原纤维粗细均匀,排列规则。(2)进行移植手术后,观察了六个月,两组创面植皮后均能愈合,两组创面收缩率差异具有显著性意义(P<0.05)。实验组术区愈后疤痕较轻,组织较柔软,收缩程度低,移植后1周ADM四周被新生血管和炎性细胞浸润,与微粒皮的粘附性差,镜下可见一些缝隙。移植后2周尚无成纤维细胞和血管长人,ADM周围有大量的新生血管生长和炎性细胞浸润,微粒皮与ADM贴附良好,已有一定程度的扩展。4周左右羊ADM与周围边界尚明显,仍被新生血管和炎性细胞浸润,数量无明显改变。16周左右羊ADM被成纤维细胞及新生血管紧密包裹、边界不清,镜下可见少量新生自体胶原纤维围绕羊ADM排列规则,24周左右羊ADM与周围组织无明显界限,镜下观察新生的自体胶原和成纤维细胞取代了部分羊真皮基质;对照组术后一周,皮下炎性细胞浸润明显,并持续三周,第四周以后有所减少。创面收缩明显,24周后组织学检查未见明显成熟的纤维细胞,血管生长,胶原纤维、弹力纤维结构及排列紊乱,表皮层薄。对两组家兔血清中IL-4、IFN-r的测得值做比较后显示:术后IL-4的水平明显高于术前,差异有统计学意义,术后实验组IL-4的水平也明显高于对照组,差异有统计学意义,实验组IFN-r的水平与术前、术后对照组差异无统计学意义。(P>0.05)。结论:异种羊脱细胞真皮在彻底脱除了基质中有免疫原性的细胞成分的同时,又保留了组织的基本结构和完整的胶原纤维支架,成为极低抗原性的真皮支架,是一种良好的真皮替代物;异种羊ADM与自体微粒皮复合移植后逐渐被自体组织取代,而新生组织纤维排列规则,外观和弹性优于单纯的自体微粒皮移植。羊ADM异种移植后激发了机体的免疫反应,免疫应答是以免疫耐受占优势,因而羊ADM移植后在体内有良好的稳定性。
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