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背景和目的特发性非特异性间质性肺炎（idiopathic nonspecific interstitial pneumonia，iNSIP）是一种具有特征性临床-影像-病理表现、独立的疾病，与其他特发性间质性肺炎（idiopathic interstitial pneumonias，IIPs)不同，归类于IIPs中慢性致纤维化型，与结缔组织病、职业暴露等无关，目前发病机制不明。iNSIP分为富细胞为主型（cellular idiopathic nonspecific interstitial pneumonia，c-iNSIP）和纤维化为主型（fibrotic idiopathic nonspecific interstitial pneumonia，f-iNSIP），病理学上表现为不同程度的肺间质慢性炎症、纤维化，不同视野病变时相基本一致，f-iNSIP预后较差。越来越多研究证实一些细胞因子在慢性纤维化疾病中起着重要作用，肺泡上皮细胞过度凋亡、成纤维细胞及炎性细胞增殖浸润参与iNSIP的发病过程。结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）是一种富含半胱氨酸的多肽，促进成纤维细胞增殖、分化、细胞外基质的合成是其主要的生物学活性；关于间质性肺疾病的研究显示，CTGF在转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）调节的纤维化进程中起着关键的作用，与肺纤维化程度呈正相关，在特发性肺纤维化（idiopalhic pulmonary fibrosis，IPF）患者人肺组织中CTGF mRNA为阳性表达。骨膜蛋白(periostin)属成束蛋白(fasciclin)家族成员，分子量为90kD，国外研究表明骨膜蛋白可被成纤维细胞分泌，在f-iNSIP患者肺组织中的表达明显增高。最近Uchida等对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型进行研究，结果显示在肺纤维化的进程中，骨膜蛋白在以中性粒细胞、巨噬细胞为主的炎症反应中发挥重要的作用。限于人体组织来源稀缺，国内外关于CTGF、骨膜蛋白在IIPs发病中作用的研究多以动物模型为主，关于人类iNSIP肺组织研究较少。病理分型是预测iNSIP预后最重要的指标，患者DLCO、PaO2下降常预示f-iNSIP患者预后不良。本实验采用c-iNSIP、f-iNSIP患者肺组织和正常肺组织标本作为实验对象来研究，从而排除物种间的差异，旨在探讨CTGF、CTGFmRNA、骨膜蛋白在c-iNSIP、f-iNSIP肺组织中的表达，并分析CTGF、CTGFmRNA、骨膜蛋白的表达与肺活检时患者DLCO、PaO2之间的关系。为深入了解iNSIP发生发展寻找分子生物学依据，并寻找预测iNSIP预后的指标。材料与方法1.对象：实验组c-iNSIP患者（8例）和f-iNSIP患者（10例），均来自在河南省人民医院住院患者开胸活检肺标本，最终诊断均由呼吸科医生会同病理科和影像科医生共同完成。患者开胸活检前已行客观检查并均未采用糖皮质激素、免疫抑制剂治疗，已排除粉尘、动物蛋白等导致过敏性肺泡炎物质接触史者、患有自身免疫性疾病的患者。对照组10例为因肺内孤立癌结节在河南省人民医院行肺叶切除术的住院患者，病理诊断为正常肺组织后选入(所取组织距癌肿≥5cm)。2.方法：（1）HE染色：观察肺组织变化。（2）CTGF、骨膜蛋白免疫组化检测：每次染色均设空白对照（PBS）和阳性对照，显微镜下观察计数阳性细胞。（3）CTGFmRNA原位杂交检测：空白对照用预杂交液代替杂交液进行，显微镜下观察计数。(4)统计学处理：采用SPSS17.0软件，表达的组间比较用Kruskal-Wallis或Mann-Whitney U检验，相关分析采用Spearman检验，统计检验均采用双侧检验，以P <0.05为差异有统计学意义。结果1. c-iNSIP组和f-iNSIP组CTGF在肺泡上皮细胞中的表达均明显高于对照组，差异有统计学意义（分别为U=17.50，P<0.05；U=11.00，P<0.05）。2. c-iNSIP组和f-iNSIP组CTGFmRNA在肺泡上皮细胞中的表达均明显高于对照组，差异有统计学意义（分别为U=8.00，P<0.05；U=15.00，P<0.05）。3. c-iNSIP组和f-iNSIP组CTGF或CTGFmRNA在肺泡上皮细胞中的表达差异均无统计学意义（分别为U=25.50，P>0.05；U=37.00，P>0.05）。4. c-iNSIP组和f-iNSIP组、c-iNSIP组和对照组骨膜蛋白在肺间质成纤维细胞上的表达未见明显异常，差异无统计学意义（分别为U=28.00，P>0.05；U=28.50，P>0.05）。5. f-iNSIP组骨膜蛋白在肺间质成纤维细胞上的表达明显高于对照组，差异有统计学意义（U=23，P<0.05）。6. f-iNSIP组患者肺组织中CTGF、CTGFmRNA、骨膜蛋白的表达与PaO2、DLCO均成负相关，P均<0.05。7. c-iNSIP组患者肺组织中CTGF、CTGFmRNA、骨膜蛋白的表达与PaO2、DLCO无相关性，P均>0.05。结论(1)肺泡上皮细胞中CTGF、CTGFmRNA表达均明显上调可能参与iNSIP发病过程。(2)在f-iNSIP患者肺组织中骨膜蛋白表达明显增高，提示骨膜蛋白参与f-iNSIP的发病进程。(3) f-iNSIP患者肺组织中CTGF、CTGFmRNA、骨膜蛋白水平升高可能提示预后不良。