微波固相合成葡寡糖及其抗氧化与免疫功能研究

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本论文对微波固相合成葡寡糖进行了合成工艺的优化,并对产物寡糖的体外抗氧化活性及对小鼠氧化应激与炎症反应的调节作用进行了研究,最后评价了葡寡糖产物的食用安全性及大剂量摄食葡寡糖产物对小鼠体内抗氧化系统的影响。使用隧道式微波加热设备进行固相合成葡寡糖,采用三因素三水平通用旋转组合设计优化合成条件;选取三种不同聚合度的微波合成葡寡糖产物(LGOS、MGOS、HGOS)进行体外清除自由基(·OH、DPPH、ABTS+·)及对小鼠氧化应激与炎症反应的研究,昆明小鼠每日分别灌胃生理盐水、果寡糖(FOS)、不同聚合度葡寡糖(LGOS、MGOS、HGOS),21 d后,腹腔注射脂多糖(LPS)诱导小鼠建立氧化应激与炎症反应模型,检测抗氧化指标(ROS、GSH-Px、CAT、T-AOC、MDA)与细胞因子指标(IL-1、TNF-α、NO、NOS);通过急性毒性试验及30 d喂养试验,来评价葡寡糖产物的食用安全性及大剂量摄食葡寡糖(2.0%、4.0%、8.0%添加量)对小鼠抗氧化系统的影响。试验结果:(1)微波固相合成最佳工艺条件:葡萄糖反应物质量为3 kg时,微波加热时间28.3 min,催化剂添加量4.4%,引发剂添加量19.6%,最大产物转化率为80.1%。(2)三种不同聚合度葡寡糖产物在体外具有很好的清除自由基能力。灌胃0.5 g/kg的不同聚合度葡寡糖产物能显著降低LPS诱导小鼠全血、肝脏的ROS水平,显著提高血浆及肝脏抗氧化酶(GSH-Px、CAT)活性及总抗氧化能力(T-AOC),显著降低MDA含量,抑制细胞因子(IL-1、TNF-α、NO)的释放及iNOS活性。相关性分析表明葡寡糖可能通过提高机体的抗氧化能力来达到对氧化应激与炎症反应的调节。(3)葡寡糖的急性毒性LD50大于15 g/kg·bw,属于无毒级别,摄食不剂量葡寡糖产物可以提高小鼠的抗氧化能力。高剂量组(8.0%)肾脏T-AOC较正常组显著降低、MDA显著升高,高剂量(8.0%)摄入葡寡糖产物可能使肾脏抗氧化能力下降。
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