【摘 要】
：
DNA的梯状断裂(DNAladder)是细胞凋亡最显著的特征之一,它是由凋亡特异的核酸内切酶在核小体间水解染色体DNA引起的,所产生的约180bp及其整数倍的片段在琼脂糖凝胶电泳中显示
论文部分内容阅读
DNA的梯状断裂(DNAladder)是细胞凋亡最显著的特征之一,它是由凋亡特异的核酸内切酶在核小体间水解染色体DNA引起的,所产生的约180bp及其整数倍的片段在琼脂糖凝胶电泳中显示为DNAladder.已经发现人体内由DNA断裂因子DFF(DNAfragmentationfactor)负责执行这一过程,它是由DFF45和DFF40两个亚基构成的异二聚体,其中DFF40携带凋亡特异的核酸酶活性,而DFF45既是DFF40的特异性抑制物,又是DFF40释放后加工所不可或缺的分子伴侣.在正常细胞中DFF45在DFF40翻译过程中即与之结合并抑制其核酸酶活性;当细胞发生凋亡时,DFF45被由上游凋亡信号活化的Caspase-3水解,释放出活性DFF40,后者切割染色体DNA形成"DNAladder".首先,利用RT-PCR从人HeLa细胞总的RNA中扩增了DFF45的cDNA,将其克隆到原核表达载体中,在大肠杆菌中获得了DFF45的高效表达,表达产物的占菌体总蛋白的56﹪并且可溶.然后,从HeLa细胞总RNA中通过RT-PCR扩增了DFF40的cDNA,构建了DFF40的原核表达载体,DFF40在大肠杆菌中单独表达时表达量可达菌体总蛋白的36﹪,但形成无活性的包涵体.利用盐酸胍将包涵体变性后,在DFF45和高浓度的DTT存在的条件下稀释复性,复性产物具有Caspase-3依赖的凋亡特异核酸酶活性.接下来,利用PCR技术去除了DFF40C端的核定位信号,构建了DFF40的缺失突变体tDFF40(truncatedDFF40).
其他文献
摘要：在全球化经济发展过程中，人们更关注自身利益，维权意识也愈来愈强。不动产的权籍调查与当前地籍调查都是土地调查和不动产产权登记工作的主要内容，因为其直接关系到城村改造、房地产开发和违法建筑等方面的处理工作，所以我们需要依照具体的实际情况，了解、分析且充分理解不动产权籍调查与地籍调查之间的关系，积极探寻并采取有效措施进行控制，处理好两者之间的关系。 关键词：新时期;不动产权籍调查;地籍调查;关系
进行人参皂甙对催乳素的基因表达与血液中激素含量的研究无论对于从分子内分泌的角度阐明人参皂甙的药理作用,还是进一步研究PRL的表达调控,都具有重要的意义.该实验采用西洋
减数分裂是真核生物有性繁殖所必需的一种细胞分裂过程。在减数分裂过程中，同源染色体分离，非同源染色体自由组合，从而产生染色体数目减半且遗传组合多样的配子。雌雄配子受精结
摘要：受全球经济和新时代发展的影响，房地产估价机构逐步面临传统银行抵押业务量价齐降，新市场份额的争夺日益激烈，在城市更新机遇下所带来的新发展模式又需要探索新的评估发展路径，对机构内部而言，人力资源管理同时也逐步占据了重要环节，笔者对于估價机构面临的新形势和新发展路径做了简单论述。 关键词：房地产估价;城市更新;抵押业务;建议对策 我国自1994年颁布城市房地产管理法后，将房地产评估赋予了法定地
摘要：伴随着我国经济的发展，电力工程建设规模逐渐扩大，电力工程的建设具有复杂性，受到市场造价以及外在环境等多方面的影响，这就使得电力工程在建设的过程中，存在多样化的经济问题，为了有效的提高电力工程建设水平，首先对电力工程建设中的经济问题进行分析，然后对具体的管理策略进行探讨，仅供有关人士参考。 关键词：电力工程;经济问题;管理策略 现阶段我国倡导开展的电网建设工作满足城乡供电的需求，在市场结构
随着风力发电在全世界范围内的高速增长,风电装机容量在电力系统中所占的比重快速提高,使得大型风电机组与局部电网之间的相互影响也越来越大。为了保障电力系统的运行安全,
CRISPR/Cas系统是存在于原核生物中的一种获得性免疫系统，其能帮助宿主抵御外源基因入侵。结核分枝杆菌中的CRISPR属于Ⅲ-A CRISPR系统。鉴于CRISPR位点的多样性，长期以来，该系
风力发电是目前可再生能源中发展最快的一种发电方式,但风速的不稳定性和间歇性决定了风电机组的出力也具有波动性和间歇性的特点,会给系统的电能质量、稳定性等造成严重的影响。随着宁波风力发电事业的不断发展,风电场中风力发电机装机容量的增大,风电在电力系统中所占比例逐渐增加,大型风电场并网运行对系统造成的影响将更加显着。因此研究风电并网对电力系统正常运行的影响以成为了迫切需要解决的实际问题,本文的研究内容如
摘要：本文的主要内容是从目前职业院校开设的模具专业的课程体系为前提，并逐渐分析出职业院校和地方企业合作建设模具设计与制造专业课程体系的重要性。并且分析了课程体系建设的有关保障措施，并进行了一定的探讨。 关键词：职业院校;地方企业;模具设计与制造;课程体系 我国模具设计与制造的高端型人才比较缺乏，而且人才的缺乏已经成为制约我国模具工业现代化进步的阻碍因素。职业院校的首要任务是为社会培养实践类的人
两栖动物的生活史研究能有助于解答两栖动物复杂生活史的起源、延续及适应进化。青藏高原独特的自然环境孕育了特殊的野生动植物多样性。然而，在全球变化的影响下，高海拔地区的