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本实验室在前期工作中筛选获得了一株针对高致病性禽流感(H5N1)的广谱中和鼠源单抗13D4，对其进行了嵌合抗体和人源化抗体的改造。血凝抑制试验(HI)和细胞中和实验已证实嵌合抗体和人源化抗体保留了亲本鼠单抗的广谱HI活性和中和活性，动物治疗试验也表明了嵌合抗体和人源化抗体对H5N1禽流感病毒具有广谱治疗效果。人源化抗体37hAb在动物实验中显示出良好的保护效果，用Octet测定其亲和力为1.55×10-8M。
本实验是在人源化抗体37hAb的基础上，利用噬菌体展示技术对其进行亲和力成熟的改造。首先用CDR替换的方法找出抗原抗体结合的关键CDR区域，即通过在NCBI的蛋白数据库中找到与37hAb的VH和VK同源性最高的3种人源抗体序列，用人源抗体的CDR区替换37hAb中对应的CDR区，检测替换了CDR区的抗体活性，实验结果确定37hAb的关键CDR区为HCDR2、HCDR3和LCDR3。
然后将上述3个关键CDR区中所有氨基酸残基进行单点随机突变，噬菌体展示ScFv并检测其活性，结果显示HCDR2有10个为保守位点，7个可变位点，其中有两个是高度可变的，5个为有限可变位点；HCDR3有9个保守位点，5个可变位点，其中3个是高度可变位点，2个为有限可变位点；LCDR3有2个可变位点，其中1个为有限可变位点1个为高度可变位点。
再根据上面得到的氨基酸变化规律，在37hAb的基础上，构建2个亲和力成熟初级噬菌体抗体库HCDR2和HLCDR3，库容分别为1.5×107和1×108，以血凝素蛋白HAO作为靶标，用固相筛选的方法对抗体库进行筛选，将其中阳性克隆测序。根据测序结果，构建亲和力成熟的次级噬菌体抗体库37HK，库容为1.2×108，最终通过不断降低包板抗原浓度，增加洗涤强度的筛选方法，得到结合能力较好的噬菌体抗体。
选择10种结合能力高的噬菌体抗体，抗体基因克隆至真核表达载体，将10种抗体的重链和轻链随机组合后，转染CHO悬浮细胞。用真核表达的亲和力成熟抗体对14株不同clade的H5N1病毒株进行广谱HI试验，用Octet蛋白相互工作站测定亲和力常数，最终得到S4-134为活性最好的抗体。S4-134对DK/Human/1265/65、Shenzhen/406H/06和CK/HK/Yu22/02三株病毒的HI滴度比37hAb高4倍，对DK/IndonesiaMS/04病毒株的HI滴度比37hAb高8倍。S4-134亲和力常数为2.79×10-9M，比37hAb的亲和力高了6倍左右。