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目的研究17-β雌二醇对大鼠大脑皮层星形胶质细胞(AS)缺氧、缺糖损伤的影响,并对其可能的机制进行初步探讨。方法原代培养Sprague-Dawley大鼠大脑皮层AS,建立缺氧、缺糖损伤模型,以吉姆萨染色观察细胞形态学变化;以透射电镜观察细胞超微结构尤其是凋亡小体的变化;以四甲基偶氮唑盐(MTT)还原实验检测细胞活力;以乳酸脱氢酶(LDH)漏出率作为细胞损伤指标;以流式细胞术检测细胞凋亡率,研究氧糖剥夺(OGD)对AS的影响。在此基础上,通过钙离子敏感的荧光探针Fura-2/AM负载细胞,荧光双波长分光光度计检测细胞内钙离子浓度的变化;以黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的变化;免疫细胞化学染色和RT-PCR方法观测凋亡相关分子Caspase-3和Caspase-12在OGD前后的变化。结果①17-β雌二醇增强细胞活力的效应10nmol/L开始出现,在20nmol/L达到最高峰;降低LDH漏出率和抗凋亡效应均从1nmol/L开始,也是在20nmol/L达到最高峰。②缺氧缺糖处理即刻、缺氧缺糖处理前6h、12h、24h、36h,加入终浓度为20nmol/L的17-β雌二醇,均使缺氧缺糖损伤AS细胞活力增高,LDH漏出率降低,细胞凋亡率降低。其中缺氧缺糖处理前24h加入17-β雌二醇在上述5个时间点中,增强细胞活力的效应最强。③缺氧缺糖损伤可使细胞内游离钙离子浓度显著增高,17-β雌二醇预处理后可明显降低钙离子浓度,调节钙稳态失衡。④缺氧缺糖损伤可致AS内SOD活性降低,MDA含量升高,17-β雌二醇预处理后可显著升高SOD活性,降低MDA的含量。⑤RT-PCR和免疫细胞化学染色结果显示,缺氧缺糖可使AS内凋亡相关分子Caspase-3、Caspase-12的表达增加,17-β雌二醇预处理后可显著抑制两者的表达。结论①17-β雌二醇对体外培养AS缺氧、缺糖损伤具有直接的保护作用,并呈一定的量效、时效关系。②17-β雌二醇可能通过调节钙离子浓度、Caspase-3和Caspase-12的表达对缺氧、缺糖损伤AS发挥保护作用。③17-β雌二醇对缺氧、缺糖损伤皮层AS的保护作用可能与提高SOD活性或降低其消耗率,从而抑制缺氧、复氧过程中大量生成的氧自由基对DNA和细胞器膜等的损伤有关;可能与降低脂质过氧化反应有关。