【摘 要】
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采用传统方法对5株新城疫病毒进行了毒力测定,根据鸡胚平均死亡时间(MDT)、3日龄脑内接种指数(ICPI)和6周龄静脉接种指数(IVPI)测定结果,FE属于速发型毒株;ND、L属于中发型毒
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采用传统方法对5株新城疫病毒进行了毒力测定,根据鸡胚平均死亡时间(MDT)、3日龄脑内接种指数(ICPI)和6周龄静脉接种指数(IVPI)测定结果,F<,48>E<,8>属于速发型毒株;ND<,98>、L<,2>属于中发型毒株;Lasota、ND<,99>属于缓发型毒株.同时对这些毒株的两项表型特征进行了试验观察,F<,48>E<,8>、ND<,98>为快速解脱型;L<,2>、Lasota、ND<,99>为慢速解脱型.ND<,98>血凝素对热最稳定,其次是F<,48>E<,8>、Lasota、L<,2>毒株,ND<,99>血凝素对热最敏感.试验结果表明血凝解脱速率、血凝素对热的稳定性两项表型特征与毒力没有相关性.不同NDV毒株对鸡、人、鼠的红细胞均表现凝集,而且与鸡红细胞的血凝效价明显高于与人或鼠红细胞的血凝效价,与其它哺乳动物红细胞的凝集性则随毒株而异.采用NDV感染鸡胚尿囊液经蔗糖反透析浓缩处理,通过SephadexG-200柱层析收集主要病毒峰,取纯化病毒液置电镜观察,NDV具有显著多形性的特征,多数呈球形病毒粒子,直径100~150nm,囊膜清晰,可见柱状紧密排列的纤突结构.贵州分离株能够在鸡胚成纤维细胞上表现生长,形成特征性的细胞病变-合胞体巨细胞;培养上清液和感染细胞悬液的血凝效价分别达到2<3>和2<6>;采用间接荧光抗体技术可以检出感染细胞胞浆中存在的病毒抗原.通过NDV免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合、HAT选择、ELISA筛选、有限稀释法克隆化培养,获得3株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,依次命名为1D<,4>、1D<,5>、16G<,12>.鉴定结果表明,3株单克隆抗体重链属于IgG<,1>,轻链属于κ链,是抗NDV的特异抗体,分别针对病毒HN蛋白的不同抗原位点.采用3株单克隆抗体对本实验室保存的9株NDV分离物进行了分群研究,A群系速发型强毒株;B群包括缓发型弱毒与中等毒力株;C群是一些介于速发型强毒与中等毒力之间的现场流行毒株.这一结果为兽医临床上确诊非典型性新城疫,鉴别强弱毒株表面抗原的差异,开展分子流行病学研究提供了实用的技术,具有广阔的应用前景.
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