论文部分内容阅读
目的:通过高脂饮食构建大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型,探讨胰岛素抵抗(IR)、脂质代谢、炎症反应在NAFLD发病机制中的作用;观察吡格列酮(PIO)和缬沙坦对NAFLD大鼠IR、脂质代谢、炎症反应的影响,为临床上药物治疗NAFLD提供参考。方法:完全随机法将56只雄性SD大鼠随机分为正常饮食组16只,予以普通饲料喂养;高脂饮食组40只,予以高脂饲料(普通饲料加1%胆固醇和14%猪油)喂养;在第8周末两组随机处死8只大鼠鉴定成模,称为8周正常对照组(NG8w)和8周高脂模型组(HG8w)。第9周开始将高脂饮食组大鼠随机分为4组,均予以高脂饲料喂养4周:12周高脂模型组(HG12w)8只,均每天予以生理盐水2ml灌胃4周;吡格列酮组(PG)8只,均予以盐酸吡格列酮片10mg/kg·d灌胃4周;缬沙坦组(DG)8只:均予以缬沙坦胶囊5mg/kg·d灌胃4周;吡格列酮+缬沙坦组(P+DG)8只:均予以盐酸吡格列酮片10mg/kg·d及缬沙坦胶囊5mg/kg·d灌胃4周。每天监测血压,处死前隔夜禁食并称重;每只大鼠经门静脉取血,离心分离血清,用于测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FBS)、血清胰岛素(FIns)、游离脂肪酸(FFA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α);计算空腹胰岛素抵抗指数(FIRI);游离肝脏并称重,计算肝指数;取小块肝组织剪碎,倒入玻璃匀浆器中匀浆,制成10%的肝组织匀浆,用于测定肝匀浆FFA、TG、TC含量;取大鼠肝右叶组织病理切片,HE染色,评价肝脏脂肪变性程度。取大鼠肝右叶组织石蜡切片,用免疫组织化学方法检测NF-κB在肝组织中的表达。结果:(1)HG8w和HG12wSD大鼠体重、肝指数、血清ALT、AST、TG、TC、FIns、FIRI、FFA、TNF-α水平及肝匀浆TG、TC、FFA均与同期正常对照组比较有统计学差异(p＜0.05);而血糖没有明显变化;光镜下,HG8w大鼠肝脏出现空泡样脂肪变性,HG12w大鼠肝脏空泡样脂肪变性呈弥漫性,伴有炎症细胞浸润;(2)PG组及DG组大鼠的肝指数、血清ALT、AST、TG、FIns、FIRI、FFA、TNF-α水平及肝匀浆TG、FFA均低于HG12w组,比较均有统计学差异(P＜0.05);DG组大鼠血清和肝匀浆的TC水平与HG12w比较没有统计学差异(p＞0.05);与DG组比较,PG组大鼠的肝指数、FIRI、血清TG、TC、FIns、FFA及肝匀浆TG、TC、FFA均降低,比较均有统计学差异(P＜0.05),而ALT、AST没有统计学差异(p＞0.05);TNF-α及NF-κB P65的表达较DG组升高,比较有统计学差异(P＜0.05)。(3)(P+D)G组大鼠的肝指数、血清FIns、ALT、TNF-α、FIRI、TG、FFA、肝匀浆TG、FFA及NF-κB P65的表达均低于PG、DG组,与之比较均有统计学差异(P＜0.05);(4)光镜下观察HE染色肝组织切片,PG、DG组大鼠肝小叶内可见肝细胞呈大泡性脂肪变性及气球样变,脂肪变性程度较HG12w减轻,偶见炎症细胞浸润;(P+D)G组大鼠肝细胞以大泡性脂肪变性为主的混合性脂肪变性,未见炎症细胞浸润。(5)FIRI分别与肝脏脂肪变性及TNF-α之间均呈正相关。结论:1.持续8周的高脂饲料喂养SD大鼠成功构建了NAFLD模型。2.PIO能改善IR,对SD大鼠NAFLD有治疗作用。3.缬沙坦能改善IR,对SD大鼠NAFLD有治疗作用。4.缬沙坦改善IR及脂质代谢方面不如PIO,但抗炎效果优于PIO。5.PIO和缬沙坦两药合用在改善NAFLD的各指标方面的效果强于单独用药,为NAFLD的治疗开辟了新途径。