大头艾纳香对萝卜蚜的生物活性研究

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本研究从广西壮族自治区境内采集117种植物,用甲醇进行冷浸提取,以萝卜蚜(Lipaphis erysimi Kaltenbach)为试虫,对植物提取物的杀虫活性进行了筛选。在活性筛选基础上,选择对萝卜蚜触杀活性高的植物大头艾纳香(Blumea megacephala Chang et Tseng)为研究对象,采用活性跟踪法对其有效成分进行了初步分离。同时通过测定萝卜蚜体内几种酶活性的变化,初步研究了大头艾纳香提取物对萝卜蚜的作用机理。采用毛细管点滴法测定了117种植物122个样品甲醇提取物对萝卜蚜的触杀活性。浓度为10μg/头时,24h校正死亡率大于80%的植物提取物有大头艾纳香、石油菜2种,校正死亡率在50%~80%的植物提取物有朝天灌、买麻藤、三叉苦、相思豆、野槭、紫茉莉、石山巴豆、金毛狗脊、山苍子、毒瓜、金线吊乌龟、仙茅、薏苡、牛耳枫、石楠藤15种,其余植物提取物的校正死亡率在50%以下。为了进一步明确和比较植物提取物对萝卜蚜触杀活性的大小,采用毛细管点滴法进一步测定了对萝卜蚜有较高活性的8种植物提取物的触杀毒力,其中大头艾纳香茎叶的触杀毒力最高,LD50为3.9597μg/头,8种植物相对毒力从高到低的顺序是:大头艾纳香>石油菜>野槭>相思豆>石楠藤>石山巴豆>薏苡>朝天灌。选择大头艾纳香作进一步研究,测定了大头艾纳香根、茎、叶和花甲醇提取物对萝卜蚜的触杀活性,茎、叶甲醇提取物对萝卜蚜24h校正死亡率分别为60.47%、64.15%,而根和花甲醇提取物对萝卜蚜24h校正死亡率分别为21.19%、41.37%,说明大头艾纳香活性成分主要在茎叶中。采用液-液萃取法将大头艾纳香茎叶甲醇提取物初步分离为石油醚层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层四部分。用毛细管点滴法测定了4种萃取物的杀虫活性,浓度为5μg/头,以石油醚萃取物的杀虫活性最高,24h对萝卜蚜的校正死亡率为68.96%,乙酸乙酯萃取物的活性低,校正死亡率为20.25%,正丁醇萃取物和水层对萝卜蚜几乎没有活性,说明有效成分主要存在于石油醚萃取物中,是低极性物质。对石油醚萃取物进行硅胶柱层析分离,经TLC检验,将相同或相似流分合并,得到17个组分,用毛细管点滴法测定各组分的杀虫活性,浓度为3μg/头时,第8组分对萝卜蚜的触杀活性最高,24h校正死亡率为89.92%,第17组分次之,24h校正死亡率为82.95%,对萝卜蚜的触杀活性24h校正死亡率在70%以上有第1、2、4、6、9组分,其活性分别为72.51%、70.86%、70.01%、73.17%、74.95%。对萝卜蚜的触杀活性24h校正死亡率在60%以上有第3、14、15组分,其活性分别为62.32%、67.05%、61.9%。其余组分活性均在50%以下。对杀虫活性成分较高的组分继续采用生物活性追踪和分离方法,结果表明,越是分离到最后活性成分则几乎平均分配到不同的组分中,因此推测可能是几种不同活性物质协同作用的结果。用大头艾纳香甲醇提取物制备制剂进行了盆栽药效试验,结果表明,大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜有较好的防效,20%大头艾纳香EC在稀释10倍时药效最高,施药24h、48h、72h后对萝卜蚜的防效分别为57.78%、77.19%、84.79%;10%大头艾纳香EW在稀释5倍时药效最高,施药24h、48h、72h后对萝卜蚜的防效分别为74.44%、84.79%、89.14%。随着浓度的降低,药效也降低。20%大头艾纳香EC在稀释30倍时,施药24h、48h、72h后对萝卜蚜的防效分别为37.78%、54.38%、60.90%;10%大头艾纳香EW在稀释20倍时,施药24h、48h、72h后对萝卜蚜的防效分别为44.44%、60.90%、71.76%。研究了大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内蛋白质含量及3种保护酶活性的影响,用大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜进行处理后,与对照相比,萝卜蚜体内CAT酶活性降低;SOD酶活性升高;而大头艾纳香甲醇提取物对萝卜蚜体内的蛋白质含量、POD酶活性没有影响。
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