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艾滋病是威胁人类生命健康最严重的疾病之一，原因之一是很难用单一疗法治疗。在近三十年艾滋病治疗的实践中，已经成功应用鸡尾酒疗法，即应用多种化学药通过多靶点的药物相互作用，力图控制艾滋病，获得较好的治疗效果。在化学药治疗艾滋病的同时，中国科研人员和临床医生也已有成效的遵循中医的辩证施治应用传统中药，治疗艾滋病人。然而，中西药治疗艾滋病的鸡尾酒疗法尚未有突破。一方面，抗艾滋病的化学药存在其缺陷，比如HIV蛋白酶抑制剂由于被体内肝药物代谢酶所代谢，其生物利用度差，影响了其药效、安全和依从性。另一方面，用于艾滋病人治疗的中药，往往对艾滋病病毒(HIV)尚缺乏显著的抑杀作用，影响了其临床使用。在应用于艾滋病治疗的化学药和中药之间是否有通过抑制或诱导肝脏药物代谢酶的相互作用？这一相互作用是否有益于化学药和中药的药效和安全，而进一步形成彼此增效中西药治疗艾滋病的鸡尾酒疗法？这对于艾滋病治疗的创新，特别在中国，有潜在的临床意义、经济效益和社会意义。 目的：研究艾滋病中药对HIV蛋白酶抑制剂-茚地那韦的代谢性相互作用，进一步评价这一相互作用的临床意义，为创新中医药治疗艾滋病的鸡尾酒疗法奠定基础。 方法： 1)中药测试物的标准化制备：应用标准化(StandardOperatingProcedure，SOP)的水煎、醇提和分离技术，制备了24个中药中66个提取部位、分离了35个单体、制备了6个复方中药的测试物。 2)茚地那韦定量方法的建立和验证：应用标准化程序(SOP)建立和验证了液相质谱联用(LC-MS/MS)茚地那韦在体外、动物体内和人体内含量的定量方法。 3)肝脏细胞色素P450药物代谢酶(CYP450)活性的定量分析方法的建立和验证：应用标准化程序，建立了CYP450七个亚酶(CYP1A2，2A6，2C9，2C19，2D6，2E1，3A4)的定量方法。 4)中药对CYP450抑制的体外研究：中药测试物在生理条件下与混合人肝微粒体进行预孵15分钟后，加入探针底物和辅酶β-NADPH进行孵育后，用LC-MS/MS定量分析代谢产物形成量，计算抑制率(IC50)，以评价中药测试物对CYPP450亚酶的影响，筛选对茚地那韦有潜在性代谢性相互作用的中药。 5)中药对茚地那韦代谢的影响的体外研究：中药测试物在生理条件下与混合人肝微粒体预孵15分钟，加入茚地那韦和辅酶β-NADPH进行孵育，在不同的时间点定量分析茚地那韦的母体浓度，计算母体清除率、评价中药对茚地那韦的代谢性相互作用。 6)中药对茚地那韦代谢影响的动物种属差异的体外研究：中药测试物在生理条件下与CD1小鼠、SD大鼠、比格犬、猕猴的肝微粒体预孵育15分钟，加入茚地那韦和β-NADPH进行孵育，在不同的时间点定量分析茚地那韦的母体浓度，计算母体清除率、评价中药对茚地那韦的代谢性相互作用的动物种属差异，为选择试验动物提供数据。 7)中药对茚地那韦代谢的影响的动物试验： 大鼠试验：雄性成年SD大鼠根据体重随机分成两组，每组3只，实验采用平行对照的方式，一组为空白对照组，一组为给药组。第1天对照组的大鼠灌胃给予生理盐水，给药组灌胃给予中药测试物，每天一次连续7天。给药期间大鼠正常饮食，每天测定动物体重，观察动物活动状态。第7天给中药测试物2hr后，经灌胃给予茚地那韦后，在0.25，0.5，1，1.5，2和4hr通过眼球静脉丛采集血样。制备成血浆后，用建立的LC-MS/MS方法，定量分析血浆中茚地那韦的浓度，计算药物代谢动力学参数，评价中药测试物对茚地那韦生物利用度的影响。 猕猴试验：雄性成年猕猴3只，采取自身对照。灌胃给予茚地那韦后，通过大隐静脉于0，15，30，60，120，240，360min分别采集血样，制备成血浆后，保持于-70℃超低温冰箱中保存，待检测。然后口服给予中药测试物，每天一次，共27天。给药期间正常饮食。每周测定动物体重。于第27天中药测试物给药后，再次灌胃给予茚地那韦，于0，15，30，60，120，240，360min分别采集血样，制备成血浆后，于-70℃超低温冰箱中保存。用建立的LC-MS/MS方法，定量分析血浆中茚地那韦的浓度，计算药物代谢动力学参数，评价中药测试物对茚地那韦生物利用度的影响。 8)中药对茚地那韦代谢的影响的临床试验： 采用开放、随机、无对照的试验设计。6名男性健康受试者用药前日入住Ⅰ期临床病房，在15日内接受整个临床试验；于试验第1、7、14天分别口服茚地那韦胶囊200mg(1粒)。口服茚地那韦后0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、12hr前臂静脉取血并制备成血浆，用LC-MS/MS定量分析茚地那韦的血浆浓度。自第一日服用茚地那韦后，受试者服用测试中药复方，每天一次，共13天。根据服用中药复方前后的血浆茚地那韦浓度，计算相应的药物代谢动力学的参数，进而评价测试中药复方对茚地那韦生物利用度的影响。 结果： 1)中药测试物对CYP450抑制的体外研究：6个用于艾滋病治疗的中药复方中，ZYSH和Aikeqing在混合人肝微粒体孵育后，对CYP3A4具有显著的抑制作用。在测试中药复方组分(饮片)中，黄芩，虎杖，乌药，黄连，大黄，大黄，甘草，苦参，丹参，牡丹皮，夏枯草，牡丹皮对CYP3A4的有较强的抑制作用。其中虎杖和黄芩最为显著。在这些具有抑制作用的中药复方组分中，下列单体白藜芦醇，木犀草素，五味子酯甲，五味子乙素，芝麻素，盐酸黄连碱和3β-甜叶悬钩子苷显示了对CYP3A4显著的抑制作用。 2.)中药对茚地那韦代谢影响的体外研究 茚地那韦在混合人肝微粒体中被迅速代谢失效，在120min孵育后，茚地那韦母体基本消失。然而中药复方ZYSH和Aikeqing与肝微粒体的预孵育能显著地防止茚地那韦的代谢失效。中药复方ZYSH和Aikeqing对茚地那韦的代谢性相互作用的增效机制呈剂量反应关系。 3)中药对茚地那韦代谢影响的动物种属差异的体外研究： 茚地那韦在人和实验动物肝微粒体孵育后的代谢稳定性提示，SD大鼠和猕猴的清除率与人相似。中药复方ZYSH和Aikeqing在SD大鼠和猕猴肝微粒体孵育中均能显著地防止茚地那韦的代谢失效。 4)中药对茚地那韦代谢的影响的动物试验： SD大鼠：试验动物在灌胃复方ZYSH七天后，茚地那韦的血浆浓度显著高于对照组，其AUC为对照组的1.9倍。支持了体外研究的发现：ZYSH能通过抑制CYP3A4而有效防止了茚地那韦的代谢失效。 猕猴：试验动物在灌胃中药复方Aikeqing二十七天后，茚地那韦的血浆浓度显著高于中药复方给药前，其AUC为给药前的19.8倍。支持了体外研究的发现：Aikeqing能通过抑制CYP3A4而有效防止了茚地那韦的代谢失效。 5)中药对茚地那韦代谢的影响的临床研究。 健康受试者在口服复方Aikeqing十三天，其中5人血浆茚地那韦浓度显著高于Aikeqing服药前，他们的血浆茚地那韦AUC分别为服药前的1.4，1.4，3.7，1.8和1.4倍。临床试验结果完善了中药复方Aikeqing对茚地那韦的代谢性相互作用的增效的证据链(体外研究-动物研究-临床研究)，为进一步创新中医药治疗艾滋病的鸡尾酒疗法，提供了翔实的数据基础。 结论： 中药的标准化制备、体外药物相互作用研究、非临床动物代谢动力学研究、临床药物代谢研究的有机组合，为探索中药的代谢性相互作用的机制，为创新中西药相互作用的增效机制有效的平台。 本文应用该平台，用体外方法评价探索了中药的代谢性相互作用的机制。从用于艾滋病治疗的中药中，筛选了对HIV蛋白酶抑制剂.茚地那韦有代谢性增效潜力的中药复方-ZYSH和Aikeqing、比较和选择了适宜的动物种属。用SD大鼠验证了ZYSH对对地那韦的代谢性相互在用的增效、用猕猴验证了Aikeqing对茚地那韦的代谢性相互作用的增效。最后应用健康志愿者的临床研究，验证了中药复方Aikeqing在治疗艾滋病人的同时，对HIV蛋白酶抑制剂茚地那韦有代谢性相互作用的增效。 本文为创新中西药治疗艾滋病的鸡尾酒疗法提供了有潜力的物质基础，为研究中药对化学药的代谢性相互作用的增效提供了有价值的经验和基础。