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布氏杆菌病（Brucellosis）是由布氏杆菌属(Brucella)的细菌引起的人畜共患的自然疫源性传染病。20世纪90年代云南省全面开展了布氏杆菌病防治监测工作，石林县被定为云南省布氏杆菌病重疫区，2008年建水县被定为布氏杆菌病监测县。通过监测发现所有感染者均有饲养山羊、奶山羊的经历，由此可见，奶山羊布氏杆菌病疫情的存在是云南省布氏杆菌病持续存在的一个重要因素。对布氏杆菌病的诊断检测目前有病原学诊断、血清学检测和分子生物学检测，病原学诊断虽作为“金标准”，但费时费力、易受主观意识影响、且存在潜在感染风险，不利于大量样本的处理和快速诊断。近年对布氏杆菌分子分型研究的深入，布氏杆菌属种鉴定有了稳定有效的技术方法，而对亚型的鉴定分析，MLVA基因分型技术和MLST基因分型技术受到关注与应用。面对家畜布氏杆菌病大规模的检疫时，血清学试验一直是重要的、便捷的方法，在基层有着广泛的应用。在2012年5月，国务院办公厅发布《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》，将布氏杆菌病作为优先防治病种，并对布氏杆菌病不同流行区作了防治考核标准。那么面对今后大规模的布氏杆菌病检测工作，对于2002年制定的《GB/T18646-2002动物布氏杆菌病诊断技术》还能否适用，是亟待探讨的问题。1.云南省三县奶山羊布氏杆菌病流行病学调查经问卷式调查，云南省石林县、泸西县和建水县奶山羊养殖户还需增强布氏杆菌病认识，改善饲养模式和繁育现状，引进新品种需要及时检疫防范布氏杆菌病感染。采集血清的实际数量总计5002份，检测群数89个。建水县的奶山羊布氏杆菌病个体阳性率最高，为7.88%；泸西县的奶山羊布氏杆菌病群阳性率最高，为55.56%，说明泸西县调查的27个行政村的奶山羊布氏杆菌病感染呈现散发，同时个体阳性率也较高（6.32%）。石林县的奶山羊布氏杆菌病个体阳性率和群阳性率均最低。从病料中分离出两株菌株，命名为YN-1和YN-2，经生化试验、单相特异性血清A、M和R凝集试验和噬菌体裂解试验，两株菌均为羊种3型，验证了奶山羊布氏杆菌病疫情的存在是云南省布氏杆菌病持续存在的一个重要因素，也说明羊种3型是云南省存在家畜布氏杆菌病感染及容易造成职业人员感染的一个重要种型。2.五种布氏杆菌病血清学试验的Kappa分析RBT、iELISA、FPA、SAT和cELISA五种血清学试验对1311份血清的检测阳性率在统计学上差异不显著（p>0.05），通过Kappa检验进行一致性分析，RBT、iELISA和FPA三种试验之间检测结果的一致性极强(KRBT/iELISA=0.9395, KRBT/FPA=0.8976, KiELISA/FPA=0.9101,p<0.01)； SAT与cELISA两种试验之间检测结果的一致性极强(KSAT/cELISA=0.9071,p<0.01)。3.布氏杆菌MLVA和MLST分型布氏杆菌MLVA基因分型中panel18个VNTR位点确定了YN-1和YN-2两个菌株是羊种布氏杆菌，聚类进化分析比对发现，基因分型结果与传统表型鉴定结果关联性不大，并体现了明显的多样性，两株菌的panel1和panel2A的序列和重复单元数是一致的，而panel2B的04、09、16三个位点的序列和重复单元数不一致。布氏杆菌MLST基因分型发现菌株YN-2属于ST8型，菌株YN-1的cobQ位点为一个新等位基因型，编号数字8，ST型就是一个新型，编号ST28。两株菌的9个基因位点得到的ST型结果与传统表型鉴定结果比较发现，两种鉴定结果关联性不大，ST型结果体现了明显的多样性。