XIAP、XAF1在胃癌BGC823细胞株的表达以及去甲基化对BGC823细胞生物学行为的影响

• 作 者: 刘玮
• 机 构: 兰州大学
• 出 处: 兰州大学
• 发表日期: 2008年期
• 关键词: 胃癌 细胞增殖 细胞凋亡 蛋白因子

目的：
胃癌的发生是一个多因素、多阶段、有序的过程。细胞的过度增殖和细胞凋亡异常是其发生的生物学基础。研究中发现一类具有明显抑制细胞凋亡作用的蛋白因子，被称为凋亡抑制蛋白因子家族(IAP)，IAP家族成员在结构上具有1至3个高度保守的杆状病毒凋亡抑制因子重复序列(BIR)结构域[1]，在肿瘤的增殖异常及对抗肿瘤药物耐受形成中发挥了重要作用，X染色体相关凋亡抑制蛋白(XIAP)是IAP家族中抑制caspase活性最强的成员。XIAP相关因子1(XAF1)是一个新近发现可以拮抗XIAP抗凋亡作用的蛋白，它可以逆转XIAP对细胞的保护。XAF1在多种肿瘤细胞和组织中存在低表达或表达缺失，XAF1的基因沉默与其启动子高甲基化明显相关[2]。本研究采用5-脱氧杂氮胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌细胞株进行处理。检测XAF1和XIAP基因表达，并分析肿瘤细胞生物学行为变化，以期进一步探讨胃癌的发生机制并寻找胃癌治疗的新方法。
方法：
将胃癌细胞BGC823分为不加任何处理的对照组和经不同浓度5-Aza-CdR处理的实验组。相差显微镜观察各组细胞形态学的改变；应用MTI、比色法检测不同浓度5-Aza-CdR对细胞增殖活性及IC50值的影响；PI染色和流式细胞仪(FCM)检测不同浓度5-Aza-CdR处理72h后细胞周期分布和细胞凋亡率；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测用药前后XAF1和XIAP基因表达的变化。免疫组织化细胞学法检测XAF1与XIAP蛋白的表达与定位。
结论：
去甲基化药物5-Aza-CdR可抑制胃癌细胞株BGC823细胞增殖；促进癌细胞凋亡：使XAF1基因甲基化状态得到逆转，而诱导该基因重新表达。