麝香保心丸对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响

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目的观察麝香保心丸对糖尿病(DM)大鼠心肌纤维化的影响及对Ⅰ型胶原、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其防治和延缓糖尿病心肌病(DCM)发生及进展的可能的细胞因子机制。方法随机选取健康SD大鼠10只作为正常对照组(NC组)、将链脲佐菌素造模成功的30只SD大鼠随机分为糖尿病模型组(DM组)、麝香保心丸低剂量治疗组(S低组)、麝香保心丸高剂量治疗组(S高组),每组10只,S低、S高组分别给予麝香保心丸50mg·kg﹣1·d﹣1、100mg·kg﹣1·d﹣1灌胃,NC组、DM组灌胃相应量的生理盐水。12周后测定左室内压力的最大上升速率(dp/dtmax)、左室内压力的最大下降速率(dp/dtmin)、左心室收缩末压(LVESP),左心室舒张末压(LVEDP),称量体重及全心、左室重量,计算心体比(H/B)和左室重量指数(LVMI);Masson染色测量心肌间质胶原容积分数(CVF);电镜观察心肌细胞超微结构;放射免疫法测定心肌局部AngⅡ的浓度;免疫组织化学法检测心肌组织中Ⅰ型胶原、TGF-β1、CTGF蛋白定性和半定量表达,western bolt方法半定量检测心肌组织中Ⅰ型胶原、TGF-β1、CTGF的含量。结果与NC组相比,DM、S低、S高组H/B、LVMI增高;与DM组相比,S低、S高组H/B、LVMI减低;S低、S高组之间H/B、LVMI有统计学意义。心功能指标:与NC组相比,DM、S低、S高组dp/dtmax、dp/dtmin、LVESP明显下降, LVEDP明显升高;与DM组相比,S低、S高组dp/dtmax、dp/dtmin、LVESP升高,LVEDP降低;S低、S高组之间dp/dtmax、dp/dtmin、LVESP、LVEDP有统计学意义。光镜:HE染色:与NC组相比,DM、S低、S高组心肌细胞排列紊乱,或可见微小心肌坏死,间质及间质胶原较多,间质纤维化明显,肌纤维部分断裂;与DM组相比,S低、S高组有不同程度改善。Masson染色:与NC组相比,DM、S低、S高组心肌细胞内胶原组织明显增多,粗大胶原相互连接成网状,排列紊乱,分布不均,紧密围绕于心肌细胞周围及小血管周围;与DM组相比,S低、S高组有不同程度改善。电镜:与NC组相比,DM、S低、S高组心肌纤维排列紊乱,局部胶原纤维灶状溶解、断裂,线粒体代偿性增生,肿胀,数量明显增多;与DM组相比,S低、S高组有不同程度改善。放射免疫法测AngⅡ的浓度:与NC组相比,DM、S低、S高组AngⅡ浓度上调(P <0.01);与DM组相比,S低、S高组AngⅡ浓度下降(P <0.01);S低、S高组之间有统计学意义。免疫组织化学法和western bolt法测蛋白表达:与NC组相比,DM、S低、S高组Ⅰ型胶原、TGF-β1、CTGF表达增加(P <0.01);与DM组相比,S低、S高组Ⅰ型胶原、TGF-β1、CTGF表达降低(P <0.01);S低、S高组之间有统计学意义。结论1、糖尿病大鼠12周可观察到心脏超微结构和心功能的损害;2、麝香保心丸能够改善糖尿病大鼠心脏超微结构和心功能;3、麝香保心丸抑制糖尿病大鼠心肌纤维化的作用可能与降低心肌组织中AngⅡ、TGF-β1、CTGF的表达有关;4、麝香保心丸对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响具有剂量依赖性。
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