【摘 要】
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拟南芥绒毡层发育及功能相关转录因子的调控网络对成熟花药发育起到重要的作用，因此，本课题基于之前对绒毡层发育调控通路的研究，进一步利用细胞学、原位杂交的技术分析了绒毡层
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拟南芥绒毡层发育及功能相关转录因子的调控网络对成熟花药发育起到重要的作用，因此，本课题基于之前对绒毡层发育调控通路的研究，进一步利用细胞学、原位杂交的技术分析了绒毡层5个转录因子(DYT1 TDF1 AMS MYB103 MS1)的遗传关系，明确了其在调控网络中的上下游关系。此外，对R2R3－MYB家族转录因子TD目的功能进行深入分析。首先，构建带有MYC/FLAG标签的基因突变体转基因株系，并进行互补鉴定。其次，建立ChIP实验体系，预期利用ChIP技术富集能被TDF1特异识别结合的下游基因。第三，基因芯片数据显示在tdf1突变体花苞中共有1790个基因有明显的表达变化(其中1252个基因下调，538个基因上调)，针对TDF1下调基因，通过多角度的生物信息学表达谱、功能聚类与启动子的分析，预测若干TDF1直接调控的下游候选基因。同时，对TDF1原核蛋白进行表达及复性，并通过酵母双杂交分析TD目的转录功能域。本课题实验结果将进一步的阐明了绒毡层特异转录因子的调控网络，同时也为解释该转录调控网络对绒毡层发育与功能所起的作用提供重要线索。
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