【摘 要】
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在真核细胞中,有许多丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶对于细胞骨架、膜组织、胞内信号和囊泡运输具有很重要的作用。在裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中,这已经被很好地证明。除了
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在真核细胞中,有许多丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶对于细胞骨架、膜组织、胞内信号和囊泡运输具有很重要的作用。在裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中,这已经被很好地证明。除了模式生物酵母,在丝状真菌稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)中存在一个Kin1蛋白激酶能够调节各种细胞进程,并且在许多致病真菌中非常保守。MoKin1的缺失降低了稻瘟病菌菌丝生长速率、产孢量和致病性。为了更好地研究Kin1蛋白激酶在稻瘟病菌中的功能,在酵母中,我们预测了一个与其互作的蛋白激酶ScCbk1。通过生物信息学的分析,在稻瘟病菌中比对到4个同源性相对较高的潜在编码MoCbk1的蛋白激酶,分别为:MGG09519、MGG05376、MGG04475和MGG02757。进一步生物信息学分析发现这4个基因主要由STKC结构域构成,且实现激酶的催化功能。我们分别对这4个含有STKC的基因利用同源替换的方法进行敲除和功能研究,进行表型分析后发现,相对野生型菌株,MGG09519基因的缺失略微减弱其生长速率和致病性,其产孢能力,孢子萌发,附着胞的形成却没有变化;而MGG04475基因的缺失则不会对其生长速率、产孢量、致病性产生较大影响。MGG02757基因的缺失导致其生长速率减缓、产孢量下降,致病性减弱,细胞核的有丝分裂和转运出现紊乱。MGG<sub>05376无法敲除,可能缺失这个基因会导致生物体致死。这些结果表明:这4个STKC结构域蛋白编码基因中的MGG09519和MGG<sub>02757基因对稻瘟病菌的营养生长和致病性有着重要作用,特别是MGG02757还调控稻瘟病菌的孢子产生,隔膜和附着胞的形成以及细胞核的有丝分裂相关进程等,有待深入研究其调控机制。
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