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目的:(1)探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)在非小细胞肺癌组织和正常肺组织中的表达及端粒酶逆转录酶与非小细胞肺癌的组织学类型,分化程度、淋巴结转移、肿瘤临床分期之间的相关性。(2)探讨p16基因甲基化及其蛋白表达在非小细胞肺癌的发生发展过程中的作用,了解p16基因甲基化与蛋白表达的相关性。(3)研究非小细胞肺癌组织中端粒酶逆转录酶表达与p16基因失活的相关性和p16基因状态对端粒酶逆转录酶活性的影响。方法:(1)随机选择45例非小细胞肺癌组织和21例正常肺组织的新鲜手术切除标本。(2)利用实时荧光定量RT-PCR法、甲基化特异性PCR(MSP)法和免疫组化(SP)法分别检测非小细胞肺癌组织和正常肺组织标本的端粒酶逆转录酶(hTERT),p16基因甲基化及其蛋白的表达情况。结果:(1)端粒酶逆转录酶hTERT mRNA在非小细胞肺癌组织的表达量为2.854±0.728,显著高于正常肺组织2.042±0.378(P＜0.01);hTERT mRNA表达与非小细胞肺癌患者的淋巴结转移和临床分期密切相关(P＜0.05),与患者的性别、年龄、分化程度、病理类型无明显相关(P＞0.05)。(2)p16基因甲基化率在非小细胞肺癌组织为57.8%,显著高于正常肺组织14.3%(p＜0.01),p16基因蛋白表达阳性率在非小细胞肺癌为51.1%,显著低于正常肺组织85.7%(p＜0.01)。p16基因甲基化与非小细胞肺癌患者的淋巴结转移情况、分化程度有显著相关性(P＜0.05),与患者的组织学类型、临床分期、年龄、性别无明显相关(P＞0.05);p16蛋白表达与非小细胞肺癌患者的临床分期、淋巴结转移情况、组织学分级、分化程度有显著相关性(P＜0.05),与患者的年龄、性别无明显相关(P＞0.05);在非小细胞肺癌中p16基因甲基化与p16蛋白表达缺失存在显著相关性(p＜0.01)。(3)端粒酶逆转录酶表达与p16基因甲基化、p16基因蛋白表达缺失呈负性相关(p＜0.01)。(4)p16基因失活组端粒酶逆转录酶阳性率72.7%,明显高于未失活组17.4%(p＜0.01),p16基因正常组端粒酶逆转录酶阴性率明显高于失活组(P＜0.05)。结论:(1)端粒酶逆转录酶表达、p16基因失活在非小细胞肺癌的发生、发展中起重要作用。(2)p16基因甲基化可能是导致非小细胞肺癌p16蛋白表达降低的一个重要机制。(3)p16基因失活可以导致端粒酶逆转录酶激活,p16基因失活的不同状态对端粒酶激活的影响存在差异。(4)实时荧光定量RT-PCR法更具有科学性和客观性。