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新生仔猪大肠杆菌性腹泻(Collbaci-lusdiarrheaofnewbornpiglet)是由产肠毒素性大肠埃希氏菌(Enterotoxigenic E.col,ETEC)引起的以1~7日龄新生仔猪下痢为特征的一种急性致死性多发性传染病。本病在世界范围内广泛流行,是影响仔猪成活率的主要因素之一。随着疫苗的研发与应用,我国新生仔猪大肠杆菌性腹泻得到了一定程度的控制,但疫苗在免疫原性、安全性等方面仍不理想。因此,为减少畜禽病害发生,同时又避免长期应用抗生素、激素类产品所造成的菌群失调、耐药性菌株增加及药物残留等负面影响,开发新型畜禽免疫增强剂是当前畜禽养殖生产中迫切需要解决的问题。本研究利用免疫学技术,通过用免疫增强剂CpG-ODN与Emulsin(Em)联合通过注射、滴鼻、口服不同免疫途径免疫仔猪从而提高了仔猪自身的免疫能力,增加仔猪对微生物病原菌的抵抗力,解决新生仔猪大肠杆菌性腹泻免疫预防这一难题。
本文利用免疫学技术,通过酶联免疫实验、细胞因子测定技术发现CpG-ODN与Em联用不仅可增强仔猪体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫,提高机体分泌特异性和非特异性IgG,IgA能力,还增强了各种免疫细胞分泌细胞因子(IL-12、IL-6、IFN-γ)从而显著提高了仔猪T helper 1-type(Th1)型的免疫作用,同时还下调T helper 2-type(Th2)型免疫中的主要细胞因子(IL-4、IL-10),从而使仔猪体液和细胞免疫系统免疫应答能力显著增强与对照组差异显著(p<0.05)。
通过微生物菌种的分离技术,分析仔猪免疫和攻毒后肠道微生物菌群的变化,其中免疫组:滴鼻100μg/kgCpG-ODN+20%Em免疫后能快速下调致病菌大肠杆菌和沙门氏菌数量,增加有益菌乳酸菌和双歧杆菌的含量,攻毒后结果表明,免疫后的仔猪死亡率下降了20%多,腹泻症状比未免疫的仔猪明显减轻。
试验结果说明,滴鼻免疫组100μg/kgCpG-ODN+20%Em能有效刺激攻毒后初生仔猪的免疫系统,提高机体的体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫的应答能力,增加先天性免疫应答能力以及抵抗外源病原菌的能力。目前,大肠杆菌引起的仔猪腹泻药物和益生菌治疗效果均不理想,因此用CpG-ODN的免疫来提高仔猪自身的免疫应答能力为畜禽疫病的防治提供了新的方向和新的思维,同时也为CpG-ODN应用于高等哺乳动物治疗疾病提供理论基础。