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中药效应物质是指中药中具有生物活性的化学成分。阐明中药效应物质基础，对有效控制中药材及其产品的质量、揭示中药药效机理、保证中药临床疗效和安全具有重要的理论和指导意义。 由于中药成分的复杂性，其发挥疗效具有整体性、多成分、多靶点协同作用的特点，使得中药效应物质基础的阐明一直进展缓慢。长期以来，国内研究中药药效物质基础主要借鉴国外植化对活性成分的研究方法:提取分离、结构鉴定、药理评价或是采用药理活性追踪的方法对中药成分进行逐步分离纯化。多年来，这样的研究方法已阐明一些中药的药效物质基础，但是，这样的分离手段操作繁琐、周期长，得到的某一种活性成分均不能代表其整体的疗效，不能全面反映中药多成分、多靶点的作用特点。因此，许多药理研究学者已建立了药效物质基础的生物分离新模式。 红花是临床用于治疗心脑血管疾病的常用中药，根据红花具有活血化瘀的功效特点，以及考虑到红细胞在微循环障碍等血液系统疾病中的重要作用，本论文重点研究了中药红花影响红细胞功能活性的药效物质基础，对筛选出的效应成分的生物活性进行了初步评价，为开发新的红花制剂提供参考。本论文研究主要分为以下几个方面: 1.基于药物产生的效应是通过与细胞膜上的受体、酶、通道等结合或进入细胞内部而实现的原理，本论文采用红细胞固相萃取/HPLC技术，首先筛选红花提取液中与红细胞特异性结合成分，再对筛选出的成分进行生物活性评价。在280nm紫外波长检测下，从红花供试液中筛选出16个与红细胞结合的效应成分，已分离出3种成分，其中有两个成分的结构已经确定，分别是6-羟基山萘酚-3-芸香糖-6-葡萄糖(6-HK-3-rutinoside-6-Glu)和6-羟基山萘酚-3-氧芸香糖苷(6-HK-3-O-rutinoside)，另外一个效应成分的结构还在鉴定中。 2.对筛选出的效应成分及红花中公认的有效成分羟基红花黄色素A(HSYA)、红花黄色素B(SYB)进行红细胞相关的药效学验证: (1)红细胞膜的黏弹性保护作用初步评价:利用红细胞渗透脆性实验对这些成分的细胞膜黏弹性保护作用进行初步评价。结果表明，药物处理组能使对应等同浓度的低渗盐溶液中红细胞渗透脆性降低，保护细胞膜的黏弹性，改善红细胞变形性。提示这些药物成分可能通过作用于细胞膜上的磷脂及蛋白质等，改变红细胞渗透脆性，进而改善红细胞变形性。 (2)对氧自由基引起的人红细胞膜流动性损伤的保护作用:采用邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生的超氧阴离子自由基O2-·致人红细胞损伤，以此为人红细胞膜过氧化损伤模型。通过荧光偏振技术，研究HSYA、SYB及筛选出的效应成分对人红细胞膜流动性的保护作用。结果显示:人红细胞膜经邻苯三酚过氧化处理后，其微粘度值升高，流动性下降，而加入HSYA、SYB及效应成分预孵育后，其流动性趋于正常值。说明这些成分可以通过对抗邻苯三酚自氧化造成的氧化损伤保护红细胞膜的流动性，揭示了这些成分改善红细胞变形性的抗氧化作用机制。 (3)对红细胞胞浆内[Ca2+]i升高和细胞形态变化的影响:采用Fluo-3/AM荧光标记和流式细胞术观察HSYA、SYB及筛选出的效应成分对钙离子载体A23187诱导红细胞胞浆内[Ca2+]i升高和细胞大小变化的影响。结果显示:这些物质对于钙离子载体负载诱发的细胞外钙内流有一定抑制作用。钙拮抗作用可能是红花改善红细胞变形性和微循环障碍的重要药理机制。