EB病毒预防性疫苗研发

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EB病毒属于疱疹病毒家族γ亚型,含有双链DNA,有包膜。EB病毒是导致传染性单核细胞增多症的主要病原体,此外,EB病毒还可以导致多种的淋巴肿瘤,如霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、NK/T细胞淋巴瘤,也可以诱发多种的上皮肿瘤,如鼻咽癌和大约10%的胃癌等。另外,对于一些具有机体免疫抑制的病人,如器官移植病人或AIDS病人等,感染EB病毒后罹患肿瘤的概率大大增加。基于以上原因EB病毒被世界卫生组织国际癌症研究机构(LARC)定为I类致癌病毒,而且在2016年11月份美国NIH编制的《第14版致癌物报告》中正式将EBV列为致癌因子,这提示EBV的感染及其所诱发的表皮癌及淋巴细胞癌已经越来越引起人们的关注,但是迄今为止,依然没有商品化的预防性疫苗可供临床使用。  以类病毒颗粒为免疫原的预防性疫苗研发已经成为疫苗研发领域的一大热点,目前已经有乙肝疫苗、HPV疫苗、戊肝疫苗和流感病毒疫苗上市。在本研究中借助类病毒颗粒展示平台--乙肝病毒核心抗原149蛋白构建了展示EB病毒膜表面糖蛋白gp350优势表位区段的嵌合类病毒颗粒。选取了位于gp350受体结合区的三个线性表位进行不同的组合展示,所构建的融合蛋白均可以在大肠杆菌中获得成功表达,通过颗粒性检测发现所有的五种融合蛋白均自组装成为类病毒颗粒。但是免疫小鼠实验显示五种融合蛋白所诱导产生的免疫应答情况不一致,其中149-3A和149-3B诱导产生了更高的血清抗体总滴度。进一步通过竞争性ELISA实验正式这两种融合蛋白所诱导的血清中的抗体主要是针对gp350蛋白的受体结合区,与EB病毒代表性单克隆抗体72A1的识别表位一致。最终通过细胞模型的阻断病毒感染实验表明149-3A与149-3B所诱导产生的小鼠血清具有更高的中和效价。  综合以上数据,成功地构建了针对EB病毒表面糖蛋白gp350优势表位的嵌合类病毒颗粒,并证实了这一平台的有效性,从而为其他糖蛋白的表位展示提供了一个可行性平台和方案。为EB病毒表位疫苗的研究奠定了基础。
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