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背景:目前的相关药物在治疗高血压疾病方面达到的控制水平并不理想,发现进而研究新型药物,改善高血压治疗效果以及探究相关机制,将广泛应用于未来高血压的疾病诊治,具有广阔的前景。研究显示,硫化氢,作为内皮依赖超极化因子的“候选者”之一,可能参与高血压的发病机制之一—血管内皮机制的过程。内皮细胞释放硫化氢后,可能激活SKCa通道,Ca2+外流导致内皮细胞膜电位超级化,进一步通过内皮平滑肌细胞间隙传导使平滑肌细胞膜电位超级化,产生血管舒张反应。但是关于SKCa通道在硫化氢引起的血压调节作用中的影响及其机制目前还不清楚,因此有必要探讨SKCa通道在H2S介导的自发性高血压大鼠肠系膜动脉的舒缩作用中的影响及其机制。目的:本实验通过对自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)(实验组)与正常对照组大鼠(Wistar-Kyoto(WKY)大鼠)持续慢性腹腔注射硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)替代物-NaHS进行干预,观察所有大鼠血压水平变化情况及其肠系膜动脉内皮细胞上SKCa通道表达的变化情况,进而探讨高血压疾病状态下给予外源性H2S相关供体NaHS与肠系膜动脉上SKCa通道表达的关系及硫化氢对血管内皮变化的影响可能存在的机制。方法:1、将20只雄性8周龄SHR大鼠和8周龄雄性WKY大鼠20只分别随机分为2组,共4组:(1)shr+生理盐水(n=10),(2)shr+nahs(n=10),(3)wky+生理盐水(n=10),(4)wky+nahs(n=10)。2、shr+nahs组大鼠和wky+nahs组大鼠分别腹腔注射浓度为56μmol/ml的nahs[1],按照各组大鼠体重(1ml/kg)行腹腔注射,每天一次,共8周;shr+生理盐水组大鼠和wky+生理盐水组大鼠分别用等量生理盐水进行腹腔注射,用量(体重比例)与nahs溶液一样,即按据大鼠体重(1ml/kg)进行腹腔注射,每天一次,共干预8周。3、8周后,各组大鼠尾动脉收缩压分别通过无创血压监测系统检测后,采用腹腔注射1%戊巴比妥钠(0.4ml/100g)[2]分别麻醉4组大鼠,取出肠系膜动脉于-80℃冰箱保存。4、验证skca通道的表达量:采用实时定量pcr法分别检测各组大鼠肠系膜动脉内皮细胞上skca通道亚基因kcnn3的mrna表达量;western-blot法分别检测各组大鼠肠系膜动脉内皮细胞上kcnn3基因蛋白的表达水平。结果:1、各组大鼠尾动脉收缩压:全部大鼠在出厂时,测得8周龄wky大鼠收缩压为107.5±7.7mmhg,8周龄shr大鼠收缩压为145.2±5.1mmhg,shr大鼠血压显著高于wky大鼠血压(p<0.0001),与实验标准相符合,可入选进入本研究;8周后,16周龄wky+生理盐水组大鼠尾动脉收缩压为108.6±7.3mmhg,wky+nahs组大鼠尾动脉收缩压为80.8±6.0mmhg,wky+nahs组大鼠尾动脉收缩压与wky+生理盐水组大鼠尾动脉收缩压相比稍有下降(p<0.05);16周龄shr+生理盐水组大鼠尾动脉收缩压为195.4±5.1mmhg,与对照组相比,血压升高,有统计学差异(p<0.05);16周龄shr+nahs组大鼠尾动脉收缩压为145.9±4.9mmhg,shr+nahs组大鼠尾动脉收缩压较shr+生理盐水组大鼠显著下降(P<0.05)。2、实时定量PCR检测KCNN3基因的mRNA表达水平:与WKY+生理盐水组相比,WKY+NaHS组大鼠肠系膜动脉内皮细胞上KCNN3亚基因mRNA表达水平没有明显改变(P>0.05);SHR+生理盐水组与WKY+生理盐水组大鼠相比,肠系膜动脉KCNN3基因mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与SHR+生理盐水组相比,SHR+NaHS组大鼠肠系膜动脉上KCNN3基因mRNA表达水平显著升高(P<0.05),差异明显,有统计学意义。3、Western Blot检测KCNN3基因的蛋白表达量:与WKY+生理盐水组相比,WKY+NaHS组大鼠肠系膜动脉内皮细胞上SKCa通道亚基因KCNN3蛋白表达水平没有明显改变(P>0.05),而SHR+生理盐水组大鼠肠系膜动脉上KCNN3基因蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与SHR+生理盐水组相比,SHR+NaHS组大鼠肠系膜动脉KCNN3基因蛋白表达水平显著升高(P<0.05),差异有统计学意义。结论:1、SKCa通道参与了高血压的发病机制;2、慢性外源性给予H2S供体NaHS可以降低SHR大鼠高血压水平,硫化氢相关供体可能成为治疗高血压疾病的潜在药物。3、慢性外源性给予NaHS可以显著上调高血压大鼠肠系膜动脉内皮细胞上KCNN3基因mRNA及蛋白质的表达水平,验证SKCa通道可能是硫化氢作用的靶点;提示硫化氢可能增加SKCa通道亚基因KCNN3的表达,改善大鼠动脉血管内皮功能,从而抑制血管口径减小,降低切应力,起到降低血压的作用。