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目的:通过建立大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)模型,探讨蛋白酶活化受体1(protease-activated receptor-1,PAR1)与大鼠脑出血后脑血管新生的相关性,以期为脑出血的治疗及康复提供新的思路。方法:1、动物分组:将100只SD大鼠随机分为3组,即假手术组(Sham组)(n=25),脑出血组(ICH组)(n=25),ICH+PAR1抑制剂组(PI组)(n=50);其中PI组又随机分为两个亚组:ICH+高剂量PAR1抑制剂组[PI(H)组](n=25),ICH+低剂量PAR1抑制剂组[PI(L)组](n=25)。每组再随机均分为1d、3d、7d、14d、21d五个时间点。2、模型建立:断尾取大鼠未抗凝自体血50ul,利用鼠脑立体定位仪,将自体血注入鼠脑右侧基底节区建立脑出血模型,假手术组只插针不注血。3、给药方法:PAR1抑制剂组在造模成功后2h给予PAR1特异性抑制剂SCH79797[PI(H)组250ug/Kg、PI(L)组25ug/Kg],溶于2ml生理盐水进行腹腔注射,其余组腹腔注射等量生理盐水。4、观察指标:于术后1d、3d、7d、14d、21d用改良神经功能缺损(modified neurological severity score,m NSS)量表进行神经功能评分,评分越高代表神经功能缺损越严重;评分后在相应时间点处死大鼠,采用干湿重法测定1d、3d、7d时间点血肿周围的脑组织含水量;HE染色法观察各时间点血肿周围脑组织微血管;用免疫组化方法测定各时间点血肿周围血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)阳性细胞数及血管性血友病因子(von Willebrand factor,v WF)阳性的微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:1.神经功能评分:(1)Sham组大鼠未出现神经功能障碍。(2)ICH及PI组在脑出血造模术后均有不同程度神经功能缺损,各组均在3d时间点神经功能评分最高;随时间延长,神经功能逐渐恢复(P<0.05)。(3)PI(H)组与ICH组比较,各时间点神经功能评分明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(4)PI(L)组与ICH组比较,各时间点神经功能评分明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。2.脑组织含水量:(1)ICH组和PI组大鼠血肿周围脑组织含水量均明显高于Sham组,各脑出血实验组均在3d达水肿高峰。(2)在1d、3d、7d各时间点PI(H)组脑组织含水量明显高于ICH组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(3)在1d、3d、7d各时间点PI(L)组脑组织含水量明显低于ICH组;差异均具有统计学意义(P<0.05)。3.HE染色观察血管新生情况:(1)Sham组各时间点可见针孔周围的脑组织结构均匀一致,偶见少量微血管。(2)ICH及PI组各时间点可见不同程度的血管内皮细胞、血管样结构及微血管增多,14d时增多最明显;与同时间点Sham组比较,ICH组及PI组新生血管结构均明显增多。(3)PI(H)组与ICH组比较,PI(H)组新生血管较ICH组减少。(4)PI(L)组与ICH组比较,PI(L)组新生血管较ICH组明显增多。4.VEGF阳性细胞数:(1)脑出血造模术后1d、3d、7d、14d、21d,ICH组及PI组VEGF表达均明显高于Sham组(P<0.05)。(2)ICH组、PI组于脑出血造模术后1d VEGF表达开始增多,14d达高峰。(3)PI(H)组与ICH组比较,各时间点VEGF阳性细胞数减少,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(4)PI(L)组与ICH组比较,各时间点VEGF阳性细胞数明显增多,差异均具有统计学意义(P<0.05)。5.v WF标记的MVD:(1)脑出血造模术后1d、3d、7d、14d、21d,ICH组及PI组MVD均明显高于Sham组(P<0.05)。(2)ICH组、PI组于脑出血造模术后1d MVD开始增多,14d达高峰。(3)PI(H)组与ICH组比较,PI(H)组各时间点MVD较ICH组减少,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(4)PI(L)组与ICH组比较,PI(L)组各时间点MVD较ICH组明显增多,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.利用未抗凝自体血注入法建立大鼠脑出血模型与人脑出血生理病理过程较相似,且不改变血液中凝血酶等PAR1激活物的活性,是开展本实验理想的动物模型。2.适当抑制PAR1可减轻实验性脑出血大鼠脑水肿程度。3.适当抑制PAR1可能通过上调VEGF表达从而促进实验性脑出血大鼠脑血管新生。4.适当抑制PAR1有利于实验性脑出血大鼠神经功能恢复。