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目的(1)建立临床相关性及重复性良好的脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后中枢性疼痛大鼠模型,探讨慢性中枢性疼痛(chronic central pain, CCP)大鼠体内N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate, NMDA)受体亚单位NR-1在脊髓背角的表达变化;(2)对SCI后CCP大鼠进行外周电刺激(peripheral electrical stimulation, PES),研究PES对NR-1亚单位表达及CCP的影响;(3)用阿片受体阻滞剂纳络酮对行外周电刺激的大鼠进行干预,从而探讨阿片受体是否参与了PES对中枢性疼痛的抑制作用过程。通过以上研究进一步探讨PES对SCI后CCP的抑制作用的可能机制,为临床CCP的治疗提供新的思路。方法本实验分三部分进行。第一部分:用Allen氏重物坠击法建立脊髓损伤后中枢性疼痛的大鼠模型。用自制脊髓打击装置对相应的脊髓节段进行打击造成脊髓挫伤,此后通过观察SCI后大鼠的自发痛行为(主要包括自噬,搔抓等)及对其机械痛阈和热痛阈变化进行测量从而判定中枢性疼痛大鼠模型建立成功与否。第二部分:检测SCI后CCP大鼠脊髓背角NR-1亚单位的表达变化,以及PES对其影响。将CCP雄性SD大鼠36只随机分成不插入不锈钢针组(A组)、在相应穴位插入不锈钢针而不行PES组(B组)、在相应穴位插入不锈钢针行PES组(C组),每组12只,另外随机选取正常大鼠12只作对照组(D组),通过检测PES后机械痛敏压力阈值(paw withdraw pressure threshold, PWPT)和热痛敏潜伏期(paw withdraw latency, PWL)的变化观察PES对CCP是否有治疗作用。第三部分:观察纳络酮对行PES治疗大鼠的影响。选取CCP雄性SD大鼠32只,随机分成行PES治疗并皮下注射纳络酮组(X1组)、行PES治疗并皮下注射生理盐水组(X2组)、仅在相应穴位插入不锈钢针并皮下注射纳络酮组(X3组)、仅在相应穴位插入不锈钢针并皮下注射生理盐水组(X4组),共4组,每组8只。24h后测量四组PWPT及PWL值。结果(1)C组与A、B两组相比,PWPT及PWL明显增高(P<0.01)且NR-1表达明显降低(P<0.01);A、B两组PWPT、PWL、NR-1亚单位表达均无明显变化(P>0.05);A、B两组与D组相比,PWPT及PWL显著降低(P<0.01)且NR-1表达明显增高(P<0.01);C组与D组相比,PWPT、PWL、NR-1表达均无显著差异(P>0.05)。(2)X2组PES治疗前后,PWPT及PWL明显增高(P<0.01);PWPT及PWL在X1组却无明显变化(P>0.05);X3、X4两组PWPT及PWL也无明显变化(P>0.05)。结论(1)SCI后CCP大鼠脊髓背角NMDA受体亚单位NR-1表达增强; PES可以通过抑制NR-1亚单位的过分表达,从而抑制SCI后CCP; (2)PES可以通过激活内源性阿片系统(尤其是μ受体)来抑制SCI后CCP的发生。