【摘 要】
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硫氧还蛋白(Thioredoxin,TRX)是一种硫氧化还原酶,催化—SH—与—SS—的氧化还原反应.近来,许多研究已经证明氧化的反应与各种生物反应过程紧密相关,并且TRX还是一些细胞的生
【出 处】
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北京医科大学 北京大学医学部 北京大学
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硫氧还蛋白(Thioredoxin,TRX)是一种硫氧化还原酶,催化—SH—与—SS—的氧化还原反应.近来,许多研究已经证明氧化的反应与各种生物反应过程紧密相关,并且TRX还是一些细胞的生长调节因子,已证实成人T白血病细胞的自分泌生长因子—成人T细胞衍生因子(Adult T-cell derived factor,ADF)即为hTRX.为了对hTRX的功能和应用作进一步的研究,作者构建了hTRX大肠杆菌表达克隆,在大肠杆菌中高效表达和纯化了人重组TRX.在克隆构建过程中,利用RT-PCR技术、基因克隆化和基因表达技术,作者首次发现了来自人胎肝的hTRX的一种新的选择性剪切形式,即缺失第3外显子的人硫氧还蛋折(hTRXδ3),经测序证实hTRXδ3缺失正常hTRX第3外显子的60bp,无其它编码区域改变,其酶活性位点依然存在.经大肠杆菌表达重组蛋白的活性分析,hTRXδ3依赖DTT催化胰岛素还原的活性明显低于公布的全长hTRX蛋白.而在依赖IL-3、GM-CSF生长的TF-1细胞(人红白血病细胞)和依赖G-CSF生长的NFS60细胞(小鼠白血病细胞)撤除细胞因子后,加入rhTRXδ3比加入rhTRX能更明显有效地抑制这两种细胞的凋亡并有促增殖的作用.该文对hTRX和hTRXδ3的大肠杆菌表达产物的生物活性进行了初步的比较,其结果为进一步研究hTRX的结构与功能提供了基础.
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