论文部分内容阅读
艾滋病之所以难治愈的一个关键问题,在于HIV病毒以潜伏状态存在于宿主细胞内,躲避药物的靶向作用。目前认为,激活潜伏的HIV-1病毒,让其暴露于药物下,是治疗艾滋病极有前景的策略。在多年的研究中发现,Prostratin和Hexamethylene bisacetamide(HMBA)两种药物能够激活潜伏的HTV-1基因的转录,然而其中详细的分子机制还不是很清楚。在我们的研究中发现,Prostratin和HMBA共同处理能够协同激活HIV-1基因的转录,然而二者却是通过不同的分子机制发挥作用。Prostratin通过激活正性转录延伸因子b(P-TEFb)从而极大的促进了 HMBA诱导的HIV-1基因的转录。同时我们发现药物共处理协同激活了 NF-κB信号通路从而激活转录的延伸。HMBA能够增强Prostratin诱导的NF-κB抑制因子IκBα的磷酸化并发生降解,促进了 NF-κB的入核从而使HIV-1基因的转录起始得到持续活化。并且进一步证实了,两种药物共处理可能是通过下调NF-κB信号通路的负性调节因子A20的表达,致使NF-κB信号通路长时间持续活化。在细胞的存活,生长,分化等基本的过程中基因的转录都是必不可少的。而正常细胞到恶性肿瘤细胞的转变也与原癌基因或一些转录因子的异常表达相关。很多年里,具有遗传毒性的化疗药物一直用于对抗癌症。这些化疗药物由于其较大的细胞毒性在临床的应用受到了很大限制,因此找到一种能降低化疗药物用量并且不影响其疗效的方法显得尤为迫切。而近年来关于转录调控和转录抑制剂在恶性肿瘤的发生发展以及治疗中功能的报道屡见不鲜,认为转录抑制剂能够增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。在我们对于结肠癌细胞研究中发现,BET抑制剂JQ1与阿霉素Dox(doxorubicin)、HU、cisplatin等化疗药物共同处理能显著的诱导结肠癌细胞HCT116的凋亡。我们选取协同效果最明显的JQ1和Dox分别处理HCT116 p53+/+和HCT116 p53_A细胞株发现,HCT116 p53_A对药物处理并没有明显的凋亡,在HCT116p53+/+用shRNA敲低了 p53的表达后,药物诱导的凋亡也被明显的抑制了。因此JQ1增加细胞的敏感性是p53信号通路依赖性的。JQ1与Dox协同诱导细胞凋亡是通过抑制抗凋亡基因Bcl-2,激活促凋亡基因BIM的表达,改变了抗凋亡基因和促凋亡基因的平衡来实现的。而且JQ1能抑制c-MYC基因的表达,但是单独敲低c-myc的表达并不会导致细胞凋亡。我们发现敲低了 BRD4的表达后,用Dox单独处理细胞能显著的增加细胞的凋亡。由此看来,转录的机制可能是一个很有前景的抗癌药物靶点,也为抗癌药物的开发提供新的理论依据和思路。