【摘 要】
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以流感病毒融合肽新和色谱体系,对六个肽库进行了亲和筛选,并通过反相HPLC分离及质谱分析,确定了各个位置上的优化氨基酸残基,得到了优选肽;GPGKHK.经过前沿亲和色谱法于0.01
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以流感病毒融合肽新和色谱体系,对六个肽库进行了亲和筛选,并通过反相HPLC分离及质谱分析,确定了各个位置上的优化氨基酸残基,得到了优选肽;GPGKHK.经过前沿亲和色谱法于0.01mol/L条件下测定,优选肽GRGKHK的表观解离常数为3.35×10<-6>mol/L,是先导结构YRSKQA的3.3倍.为获得与融合肽FP有更强亲和作用的肽段.从优选肽GRGKHK的N端延长序列,每次只延长一个氨基酸残基.以固相混合合成法建立相应的肽库,并进行亲和筛选与鉴定.在筛选时,同时逐步增强离子强度.经过5次循环,采用前沿亲和色谱法测得11肽与固定化融合肽之间的表观解离常数为3.15×10<-6>mol/L,显示了大大增强的亲和相互作用.这一结果验证了基于反义肽战略的组合化学位置扫描新方法的合理性和可行性.以FMOC固相肽合成战略,采用混合裂分组合合成的方法,建立了偏五肽库,X-X-X-X-Gly,库容为1.05×10<5>.以流感病毒融合肽亲和色谱体系,对其进行了初步筛选,探讨了亲和筛选的条件,对洗脱峰进行了反相HPLC分析和质谱鉴定.
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