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第一部分发育期大鼠癫痫后相关抑郁行为及其干预研究目的:观察发育期大鼠癫痫后是否出现抑郁行为,糖皮质激素干预是否影响发育期大鼠癫痫后抑郁行为。方法:21d龄SD雄性大鼠随机分为3组(n=20):阴性对照组(Control组)、癫痫持续发作组(SE组)、癫痫持续发作+地塞米松组(SE+DEX组)。采用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品(Licl-Pilocarpine)建立发育期癫痫发作动物模型(SE),SE+DEX组在止惊后腹腔注射DEX[3mg/(kg·d)],连续7天,SE组和Control组大鼠在相同时间点以相同给药方式给予等量生理盐水。干预结束后,每周1次连续三周,采用蔗糖偏爱试验(SPT)、旷场试验(OPT)、强迫游泳试验(FST)检测大鼠癫痫后抑郁行为。结果:(1)与Control组比较,SE组连续三周SPT中蔗糖消耗率均显著降低(依次为:86.5±3.02%vs.71.63±10.18%,88.25±2.82%vs.69.75±8.24%,87.13±3.31%vs.68.50±8.65%,p值均<0.05);实验结束后1、2周,SE+DEX组蔗糖消耗率与SE组相似;但在第三周,SE+DEX组蔗糖消耗率显著高于SE组(78.8±2.80%vs.68.50±8.65%,p<0.05);(2)与Control组比较,SE组在旷场中央位置停留时间减少(4.725±2.566s vs.1.250±0.553s,p<0.05),而SE+DEX组与Control组比较无显著差异,SE+DEX组在旷场中央区停留时间较SE组显著延长(4.0±2.349s vs.1.250±0.553s,p<0.05);SE组大鼠活动轨迹较Control组表现出更多地集中在旷场边角;旷场实验中三组运动距离无显著差异;(3)FST测试在水中不动时间(IMT),SE组显著增加长于Control组(53.738±22.544s vs.27.175±11.858s,p<0.05);而SE+DEX组较SE组显著缩短(22.850±7.845s vs.53.738±22.544s,p<0.01)。结论:(1)脑发育期幼龄大鼠在SE后出现抑郁症状,且抑郁行为持续到TLE慢性期;(2)地塞米松短疗程干预可能部分改善发育期大鼠癫痫后抑郁行为。第二部分NLRP3/GSDMD/IL-1β通路在发育期大鼠癫痫后抑郁行为中的作用目的:探讨NLRP3/GSDMD/IL-1β通路在发育期大鼠癫痫后抑郁行为中的作用。方法:21d龄SD大鼠随机分为阴性对照组(Control组)、癫痫持续发作组(SE组)、癫痫持续发作+地塞米松组(SE+DEX组)。行为学测试完成后采用Western blot和RT-q PCR方法分别测定海马炎症小体组分NLRP3、GSDMD蛋白及m RNA的表达,ELISA法检测海马IL-1β水平情况。结果:(1)Western blot检测发现,与Control组相比,SE组和SE+DEX组的NLRP3蛋白表达水平均显著升高(0.692±0.257 vs.0.139±0.144,0.624±0.185 vs.0.139±0.144,P值均<0.05),SE+DEX组与SE组相比无显著性差异;与Control组相比,SE组GSDMD蛋白表达水平显著升高(0.719±0.031 vs.0.291±0.154,P值<0.05),SE+DEX组与Control组相比无显著差异,SE+DEX组GSDMD蛋白表达水平与SE组相比显著降低(0.383±0.112 vs.0.719±0.031,P<0.05);(2)RT-q PCR检测发现,与Control组相比,SE组NLRP3 m RNA相对表达明显升高(2.697±0.220 vs.1.058±0.043,P<0.05),SE+DEX组与Control组相比无显著差异,SE+DEX组较SE组显著降低(1.397±0.655 vs.2.697±0.220,P<0.05);与Control组相比,SE组的GSDMD m RNA相对表达显著升高(1.798±0.077 vs.1.107±0.085,P<0.05),SE+DEX组与Control组相比无显著差异,SE+DEX组较SE组显著降低(1.143±0.437 vs.1.798±0.077,P<0.05)。(3)ELISA法检测发现,与Control组相比,SE组大鼠海马组织IL-1β水平显著升高(571.37±18.48pg/ml vs.221.98±87.16 pg/ml,P<0.001),SE+DEX组无显著差异(299.44±119.35 pg/ml)。SE+DEX组大鼠海马组织IL-1β表达低于SE组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:(1)炎症小体NLRP3/GSDMD/IL-1β可能参与了发育期大鼠癫痫后抑郁的发生发展。(2)地塞米松短疗程干预可能通过下调GSDMD/IL-1β表达改善发育期大鼠癫痫后抑郁行为。