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本论文研究由2个相互联系又相对独立的部分组成:慢性期与晚期SIV感染中国恒河猴免疫激活差异研究;氯喹对pDC激活的抑制及其对AIDS发病进程影响机制研究。
近年来的研究结果认为,在HIV感染期持续的非特异免疫激活与CD4+T细胞的大量损失和艾滋病发病过程密切相关。但是,导致体内免疫激活的确切机制目前尚不清楚。很多研究人员倾向于认为在慢性感染期,血液中高含量的HIV病毒颗粒是造成免疫激活的主要原因。HIV作为单链RNA病毒,可以被pDC经细胞吞噬作用吞入其内体,之后被表达于内体上的TLR7和TLR9识别并引发下游信号转导,产生大量的Ⅰ型干扰素。Ⅰ型干扰素持续性以高水平存在,导致对CD4+T细胞、CD8+T细胞和单核细胞的非特异激活并影响各亚群细胞的表型、功能和其寿命,从而导致艾滋病进展的加速。此外,有实验表明,体内高水平的LPS可能也是HIV感染过程中持续的免疫激活的重要因素。因此,对免疫激活机制进行深层次研究有助于揭示AIDS的发病机制和制定有效地临床治疗方案。
我们实验室已建立了标准的SIVmac239感染中国恒河猴AIDS动物模型,可以作为AIDS发病机制研究的有力工具。为了寻找免疫激活对SIV感染的中国恒河猴的影响机制。我们分别检测了SIV慢性感染期和晚期以及SIV阴性中国恒河猴免疫激活的差异。研究发现:SIV感染可以导致pDC的激活,同时伴随着CD4+T细胞的激活和凋亡水平的增加。很有趣的是,我们的实验结果显示,晚期感染的中国恒河猴免疫激活较慢性感染期严重,从而为病毒导致的pDC免疫激活对AIDS进程的促进作用的观点提供了支持。
同时,我们通过实验验证了氯喹在体外细胞水平和体内抑制pDC激活的作用。氯喹作为碱性物质,可以通过渗透进入细胞内体,通过抑制内体的酸化和成熟来阻断病毒RNA通过TLR7和TLR9引发的的信号通路,从而抑制pDC的活化和I型干扰素的分泌。我们发现氯喹体外抑制TLR7和TLR9的配体对pDC的激活及Ⅰ型干扰素的分泌作用明显。通过30天的灌胃给药,我们发现氯喹可以有效地抑制pDC激活,但是对T细胞的激活和数量变化以及病毒载量影响较小。
本论文研究为免疫激活对艾滋病进展的作用机制提供了数据,同时验证了氯喹作为免疫激活抑制剂成为抗AIDS药物的潜在价值,对AIDS的发病机制和临床治疗研究具有重要意义。