【摘 要】
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目的: 探讨免疫脂质体的制备方法,利用免疫脂质体建立应用于实验诊断的脂质体免疫裂解试验和酶联免疫吸附试验。方法: 一、对不同制备方法、不同标记酶分析比较后,采用逆相蒸
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目的: 探讨免疫脂质体的制备方法,利用免疫脂质体建立应用于实验诊断的脂质体免疫裂解试验和酶联免疫吸附试验。方法: 一、对不同制备方法、不同标记酶分析比较后,采用逆相蒸发法制备包裹辣根过氧化物酶的脂质体,通过单因素考察和正交设计筛选最佳制备条件。 二、应用戊二醛交联法将辣根过氧化物酶脂质体与兔抗人IgG结合,探索最适偶联条件,制备了既包裹酶又具有免疫活性的脂质体。 三、利用脂质体免疫裂解试验检测人 IgG。探讨以免疫脂质体为酶标记物建立酶联免疫吸附试验,检测抗丙型肝炎病毒抗体。结果: 一、应用逆相蒸发法制备的辣根过氧化物酶脂质体数量多,圆整均匀,具有较高的酶活性。最佳制备条件为:取卵磷脂30mg、胆固醇15mg、磷脂酰乙醇胺 5mg,溶于 15ml 氯仿/乙醚(体积比 1:1)混合有机溶剂中,37℃减压旋转蒸发形成薄膜。再加入有机溶剂 15ml 和含 HRP3mg的 PBS 缓冲液 5ml,超声 5min 乳化后,在 37℃恒温水浴中旋转蒸发至粘性凝胶状,再继续减压蒸发转相呈液态,补充 PBS 缓冲液至 5ml,
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