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目的:研究蛋氨酸-脑腓肽非受体途径的神经保护作用。方法:本研究选用了人类来源和鼠来源5种不同的胶质瘤细胞株。即人胶质母细胞瘤细胞株(U87-MG),人脑胶质瘤细胞株(U251),人脑神经胶质瘤细胞株(H4),和大鼠星形胶质细胞瘤细胞株(C6),大鼠多形性胶质瘤细胞株(RG2)。细胞均分为实验组和对照组。其中实验组加入10umol L-1M-enk,对照组加同等体积的灭菌水,两组在5%的CO2的温箱中孵育24h后,提取细胞代谢产物,采用毛细管电泳-质谱(CE-MS)检测细胞内代谢物变化,通过多元分析方法找到最显著变化的代谢物。为了进一步探讨最显著变化的代谢物可能的神经保护作用。以U87-MG细胞为例,将最显著变化的代谢物配置成不同浓度的梯度,加入U87-MG细胞中,使用WST-1法检测细胞活性,绘制生长曲线。细胞分为实验组和对照组。其中实验组加入不同浓度的最显著变化的代谢物,对照组加同等体积的灭菌水。两组在温箱中孵育24h后,使用NO检测试剂盒检测胶质细胞NO的释放量。q-RTPCR检测细胞内某些髓鞘化相关基因的表达。采用流式细胞仪检测最显著变化的代谢物在不同时间作用下胶质细胞内细胞周期的分布。结果:蛋氨酸-脑腓肽作用下,实验组和对照组的代谢组学数据经多元分析方法找到显著变化的代谢物为蛋氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)和双甘肽(Glycylglycine),其中双甘肽变化最显著。以U87-MG细胞为例,双甘肽与M-enk在抑制胶质细胞的生长和增殖时效果相同。但是与M-enk作用不同的是它也减少了胶质细胞内NO的释放。双甘肽对神经保护作用表现为提高了胶质细胞内某些髓鞘化相关基因的表达。此外,本研究还发现双甘肽不是通过DNA损伤影响细胞增殖的。这点与M-enk不同。结论:蛋氨酸-脑腓肽(M-enk)作用于胶质瘤细胞时,其代谢物发生变化,表现为4种氨基酸类代谢物的显著增加,进一步的实验证实这些代谢物中双甘肽对胶质瘤细胞的生长和增殖有抑制作用。减少了胶质细胞内NO的产生。此外,还证实双甘肽对神经的保护作用超越了传统的OGF-OGFR通路的作用。但是所选细胞系均来自不同细胞系的胶质瘤细胞。如果是原代的细胞,实验结果更具有临床研究价值。