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针对广东省内无草莓脱毒苗供应及有关研究几乎是空白的现状,本研究以丰香、法兰第、卢比和2H 4个草莓品种为材料,首先对在我省被广泛种植的草莓品种法兰第进行茎尖培养,就植物生长调节剂种类和浓度、培养基凝固剂和光周期等因素对茎尖培养效果的影响进行研究;其次,就丛芽培养的激素浓度,以及叶片培养的基因型、激素配比、外植体类型、外植体放置方式和暗培养时间等各个因素进行了研究。主要研究结果如下:
1.茎尖培养
NAA浓度的增加会导致愈伤组织产生量的增加以及分化率和分化速率的下降,单独使用6-BA进行茎尖培养优于6-BA4-NAA组合。在培养基中加入KT不会增加茎尖再生过程中愈伤组织的产生量,同时又能促进再生芽生长并提高其增殖速率,采用0.5 mg/L6-BA+1.0 mg/LKT的激素配比获得较好的培养效果。用卡拉粉作培养基凝固基会增加愈伤组织的产生量,降低芽再生效率。而琼脂培养时分化率提高且芽丛较大,是较合适的凝固剂。暗培养导致产生较大量的愈伤组织且分化难,以24 h光照培养为好。
2.NAA浓度对丛芽增殖的影响
NAA浓度与基因型间互作极显著。对大部分品种来说,高浓度NAA会使试管苗基部产生大量的愈伤组织且降低丛芽增殖系数。但2H在不添加NAA或其浓度低时丛芽出现玻璃化等形态变异,NAA浓度较高时其植株却正常生长。
3.叶片离体培养
叶盘的再生能力明显强于叶柄的再生能力。不同品种的叶盘芽再生能力有很大的不同,4个供试品种的再生力依次为:法兰第>2H>丰香>卢比。在叶盘培养中,2种细胞分裂素与4种生长素间的互作极显著,6-BA更适宜与2,4-D搭配使用,而TDZ与IBA配合使用的效果最好;总体上来说,TTDZ的培养效果明显优于6-BA。基因型与细胞分裂素、生长素以及叶盘放置方式间均存在着显著的互作效应,需要根据具体的基因型来确定激素配比和叶盘放置方式。琼脂诱导叶盘芽再生的效果优于卡拉粉。暗培养并不能有效提高叶盘再生率,草莓叶盘培养中可不采用暗处理。