【摘 要】
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本文对枯草芽孢杆菌中类硫氧还蛋白YkuV溶液结构和活性进行了研究。主要内容如下: 一、应用核磁共振技术解析了YkuV在氧化态和还原态的三维结构。结构比较表明YkuV属于类硫
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本文对枯草芽孢杆菌中类硫氧还蛋白YkuV溶液结构和活性进行了研究。主要内容如下:
一、应用核磁共振技术解析了YkuV在氧化态和还原态的三维结构。结构比较表明YkuV属于类硫氧还蛋白家族中的类谷胱甘肽过氧化物酶家族。与同一家族的蛋白质的结构比较表明YkuV可能发挥氧化还原酶的功能。
二、用荧光光谱法测定了YkuV的氧化还原电势。YkuV较低的氧化还原电势说明它有能力作为一个氧化还原酶还原下游的底物。
三、用核磁共振技术研究了YkuV的主链<15>N的动力学性质。在YkuV的活性中心区的残基存在皮秒到纳秒时间尺度的内部运动和微秒到毫秒时间尺度的构象交换。
四、将YkuV与可能的底物进行相互作用,用核磁共振谱进行检测。YkuV能够还原Trx的底物ArsC和Tpx,并且YkuV能被Trx的还原酶(TxR)还原,显示出与Trx相似的氧化还原性质。
五、通过对YkuV所在操纵子上的基因的分析,发现YkuV可能与YkuU基因编码的YkuU相互作用发挥生物学功能。生物信息学分析,同源结构分析和蛋白质相互作用实验表明YkuV-ykruU可能是枯草芽孢杆菌中一个新的氧化还原系统。
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