【摘 要】
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本文(1)综述了4CL基因在木质素生物合成代谢中的研究进展;指出了基因工程手段进行木质素代谢调控在苎麻育种中的重要性。(2)以苎麻“中苎1号”为材料,采用PCR方法,以简并引物从
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本文(1)综述了4CL基因在木质素生物合成代谢中的研究进展;指出了基因工程手段进行木质素代谢调控在苎麻育种中的重要性。(2)以苎麻“中苎1号”为材料,采用PCR方法,以简并引物从苎麻基因组DNA模板中,首次克隆了4-香豆酸辅酶A连接酶-1基因(4CL-1)的DNA部分序列,长度为983bp:采用RT-PCR的方法,以特异引物,从苎麻茎RNA反转录的cDNA为模板中,首次克隆了苎麻4CL-1cDNA核心序列,长度为110bp;经生物信息学方法分析,得知所获得的基因序列编码一段含37个氨基酸残基的多肽,该多肽与几个酰基合成酶和AMP结合酶的同源性较高,可以推论其编码了AMP形成与结合的保守区域。(3)设计了构建RNA干扰载体方案、提出获得转基因工程农杆菌的方法,总结试验中所遇到的难题,探讨了解决问题的方法。(4)针对苎麻遗传转化难于获得有价值转基因材料的瓶颈问题,借鉴用于拟南芥花序浸渍法的经验,以含反义CCoAOMT基因的工程农杆菌LBA4404(anti-BNCCoAOMT)和LBA4404(anti-NTCCoAOMT)对苎麻花序喷雾接种,探索了苎麻花序喷雾法遗传转化的方法。为利用基因工程手段进行苎麻木质素代谢调控奠定了基础。
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