【摘 要】
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该研究应用半定量RT-PCR方法证实海风藤能够降低APPmRNA表达,海风藤对APPmRNA表达的抑制作用随药物浓度的提高和作用时间的延长而增强.此外,选用APP多克隆抗体CT695,Western
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该研究应用半定量RT-PCR方法证实海风藤能够降低APPmRNA表达,海风藤对APPmRNA表达的抑制作用随药物浓度的提高和作用时间的延长而增强.此外,选用APP多克隆抗体CT695,Western Blot证明海风藤生药对APP蛋白质四种同功异构体的表达均有抑制作用,以降低成熟APP751/770的表达最显著.当海风藤浓度为50g/l时,对APP总蛋白质表达的抑制率可达70﹪.在该课题的第二部分,我们以APP为靶标,用人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH作为体外筛选体系,半定量RT-PCR方法对海风藤分离组分进行了有效组分的筛选.两种分离方法中,第一种方法海风藤有效成分被平均分离到了Ⅲ-1、Ⅲ-2和Ⅲ-3三个组分中,APP基因的表达量仅为阴性对照的1/4.第二种分离方法效率较高,有效成分主要集中在两个分离组分中,组分Ⅱ-3APP基因的表达量为阴性对照的20﹪,三次试验均未检测到组分Ⅱ-4APPmRNA的RT-PCR扩增产物,β-actin表达正常,说明组分Ⅱ-4含有海风藤抑制APP基因表达的主要成分.总之,该试验的研究结果表明海风藤生药及其分离组分均能有效的选择性抑制APP基因的表达.海风藤为AD的治疗提供了一种新的候选药物.
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