鳗弧菌铁调节外膜蛋白的免疫效果及五种致病性弧菌铁调节外膜蛋白表达的研究

来源 :上海水产大学 上海海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuhua_ly
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本试验分为两部分,第一部分针对海水鱼类养殖过程中常见的致病性鳗弧菌株L-18株,考察其在限铁条件下的生长情况及铁载体、铁调节外膜蛋白(IROMP)的表达,并比较全菌疫苗、外膜蛋白(OMP)和IROMP的免疫效果,为从铁摄取系统方面研发新型疫苗提供参考;第二部分研究了五种常见致病性弧菌鳗弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌和河流弧菌的限铁生长条件,并比较了其铁调节外膜蛋白表达的差异,为研究其铁摄取系统的交叉反应及交叉保护,进而研制可能的多价或联合疫苗提供数据。免疫部分的试验在中国水产科学院黄海水产研究所麦岛试验基地进行。 1.以一株从患病牙鲆体内分离到的鳗弧菌L-18株作为研究对象,考察了其在限铁培养条件下的铁摄取系统的表达,通过免疫印迹试验考察了IROMPs的免疫原性,并通过主动免疫比较了全菌灭活疫苗、OMPs、IROMPs对牙鲆的免疫保护力。结果表明,在TSB培养基中加入不同浓度的2,2-联吡啶,L-18株的生长表现出一定的规律;验证了儿茶酚类铁载体和74.3ku、77.4ku IROMPs的表达;免疫印迹试验表明,77.4ku IROMPs具有免疫原性;免疫牙鲆的试验结果表明,各疫苗的免疫保护力为:全菌疫苗79.3%,OMPs疫苗51.8%,IROMPs疫苗75.9%,IROMPs的免疫保护力显著高于OMPs。虽然IROMPs与OMPs的血清杀菌活力没有显著差异,但其抗体效价却显著高于OMPs。因此,鳗弧菌L-18株的IROMPs是一种良好的免疫原,能够显著提高OMPs的免疫保护力,可能成为一种新型高效的疫苗。 2.考察了五种致病性弧菌:鳗弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌和河流弧菌的适宜的限铁生长条件,以及所表达IROMPs的异同。结果表明,以TSB+2,2-联吡啶为限铁培养基,各种弧菌的适宜限铁生长条件有较大差异,其对2,2-联吡啶的要求是:鳗弧菌为100~130 μmol·L<-1>,副溶血弧菌250 μmol·L<-1>,溶藻弧菌150μmol.L<-1>,哈维氏弧菌130μmol·L<-1>,河流弧菌150μmol·L<-1>。五种弧菌在限铁条件下,均可表达各自的IROMPs:鳗弧菌表达出74.3ku、77.4ku IROMPs; 鳗弧菌铁调节外膜蛋白的免疫效果及五种致病性弧菌铁调节外膜蛋白表达的研究副溶血弧菌是68.4ku、71.2ku、72.9ku、74.3ku、77.0ku数种蛋白的加强表达;溶藻弧菌是70.4ku、72.9ku、74.5ku和77.0ku数种蛋白的加强表达,并表达出新的81.1ku和84.8ku蛋白;哈维氏弧菌新增表达了82.0ku和83.6ku蛋白;河流弧菌新增表达了77.4ku和82.7ku蛋白。参照电泳图谱,五种弧菌的IROMPs都出现在约70.4ku~84.8ku的范围内,并且某些蛋白带具有一定的相似性,比如鳗弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌都表达了约74.5ku和77.0ku的蛋白;另外溶藻弧菌、哈维氏弧菌和创伤弧菌都新增表达了约81.1ku-82.7ku。的蛋白,不排除相似分子量的蛋白就是一种蛋白的可能。能否据此推测某些弧菌利用相同的蛋白摄取铁,进而利用此点开发针对弧菌的高效多价疫苗,还有大量的工作要做。 本文在前人对鳗弧菌IROMPs结构和特性的研究基础上,首次考察了鳗弧菌IROMPs的免疫效果,发现其免疫效果与OMPs相比有大幅度提高;首次从同属内种间差异角度对五种弧菌的IROMPs进行了比较,并发现了其异同之处。本文填补了弧菌IROMPs的免疫效果领域的空白,为开发新型渔用弧菌病疫苗提供一种思、路,并为研究数种弧菌很可能存在的共有的摄铁机制提供依据,为开发铁摄取系统相关的弧菌多价疫苗提供理论基础。
其他文献
一个好的教学方式能够有效调动学生的学习欲望,凸显学生的主体地位.高效的数学课堂不只是教师简简单单地讲、学生听听即可,而是需要师生间的互动.因此,在初中数学教学中培养
现代信息技术的广泛运用,使得教学不再以单一的文本形式出现,教师也不用再照本宣科,而是采用三位一体的多媒体教学,通过声音、图片和影像等多媒体进行展示,并结合传统的教学
传统的生物实验课堂教学,容易让学生在长期枯燥乏味的学习中消磨对学习的积极性与兴趣.因此,高中生物教师必须及时更新自身的教学理念,转换自身与学生的角色关系,通过为学生
普通话水平测试中命题说话考的是应试人说普通话的水平,要求语音标准,词句规范,表达自然、流畅.朗诵、背诵、演讲等腔调及使用方言词、方言句式、时髦用语等都偏、离测试要求
在传统教育模式的影响下高中的物理教学常常注重理论知识,并且知识教授存在着形式主义的缺点,一般来说物理实验的开展都是需要教师进行演示,给学生们演示完成之后,学生模仿教
随着教育教学的不断发展,对教师的要求也发生了变化:要求教师不仅要关注学生的学业成绩和身体健康,而且还要细心关注学生的心理发展.特别是作为一个与学生有着密切联系的班主
随着信息技术的不断成熟,其在教育领域中发挥出了重要作用,不仅丰富了教学内容,还改变了教学模式,有利于提升教学水平.基于此,本文就针对农村初中数学教学与信息技术融合进行
舍伍德·安德森是美国文学史上一位享有盛誉、影响深远的现代作家,他在短篇小说集《小城畸人》中向我们展示了一群社会畸人的悲剧命运。本文以其中的一篇小说《母亲》为范本,
摘 要:委婉语和禁忌语是两个普遍的语言现象。然而,长期以来人们对两者的关系缺乏科学的认识。为了加深对两者的理解,笔者从历史、定义和社会功能方面论述了两者的不同点,又从理论基础和存在领域两个方面论述了两者的相同点。  关键词:委婉语 禁忌语 不同点 相同点    引言    委婉语和禁忌语是两个普遍的语言现象。在日常交际中,由于各种原因,当人们不愿或不能直接表达自己所想时经常诉诸委婉语的使用和禁忌语
摘 要:本文简单介绍了语言测试在语言教学中的目的和作用,并分析了语言测试的基本要求。同时回顾和总结了语言测试理论在过去两三个世纪中的发展历程,提出了语言测试在语言教学中发展趋势及可能的研究方向。  关键词:语言测试 语言教学 测试的基本要素    测试通常是检查教学质量的一种有效手段,是教学过程中不可缺少的一个重要组成部分,在英语教学中,科学合理的测试会对教学起到积极的反拨作用。随着外语教学理论的