转录抑制子Tle3/Grg3对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响

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乳腺癌作为威胁女性健康最为常见的恶性肿瘤之一,其发病率在中国呈明显上升趋势。乳腺癌细胞因具有的无限生长、转化和转移三大特点,使其难以被消灭。因此深入研究其增值、迁移和侵袭特性的信号通路和作用机制,对阐明耐药肿瘤细胞侵袭性增强的分子机制具有重要作用,并且能对临床耐药和肿瘤转移治疗提供新的治疗靶点。  转录抑制子Tle3(transducin-likeenhancerofsplit3)属于一类以果蝇Groucho(Gro)蛋白为原型的转录辅助抑制因子(transcriptionalco-repressor)家族,在胚胎发育和器官形成等生理过程中都发挥重要作用。本文首先培养多种肿瘤细胞(乳腺癌细胞:MCF-7、MDA-MB-231、ZR-75-30;肺癌细胞:H1299、A549、H661、LTEP-a-2等)并分别提取RNA及蛋白,通过RT-PCR、荧光定量PCR、Westernblot及Transwell实验,研究转录抑制子家族成员TLE1、TLE2、TLE3、TLE4的表达与肿瘤细胞增殖和迁移表型的相关性。结果发现Tle3在增殖及迁移速度都很慢的乳腺癌上皮型细胞MCF-7中表达量很高,但在增殖及迁移速度都很快的间质型细胞ZR-75-30中表达量却非常低。而运用Tle3特异性siRNA以及外源Grg3高表达质粒工具,我们发现在MCF-7细胞中干扰Tle3的表达能促进MCF-7迁移能力并且上皮标志物E-cadherin表达水平明显下调而间质类型标志物Vimentin表达量明显上调,即发生明显的EMT过程;相反,在ZR-75-30细胞中高表达Tle3则明显抑制其增殖、迁移能力,并且伴随着间质类型标志物Vimentin表达量明显下调而上皮标志物E-cadherin表达水平明显上调,即明显的MET过程。因此说明Tle3可能是影响乳腺癌细胞增殖及迁移能力的关键因子。
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