用免疫印迹(Western blot)技术检测水稻中的白叶枯病菌

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snowtea1987
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻是世界上最重要的粮食作物之一,白叶枯病是危害水稻最为严重的细菌性病害,在过去的十几年中,多个水稻抗白叶枯病基因以及白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)的无毒基因的被克隆,水稻及Xoo的全基因组测序也已经完成,所以水稻-白叶枯病菌互作体系是植病研究的重要模式系统,建立并优化白叶枯病菌的检测方法具有重要的理论意义和应用价值。免疫印迹(Western blot,WB)技术有使用方便、特异性强、灵敏度高、假阳性率低等特点,在植物和动物病原物检测中有重要的实用意义。  本研究以Xoo全蛋白质为免疫原,制备了Xoo多克隆抗体,该抗体能够识别所有受检的Xoo小种,没有Xoo小种特异性,与水稻、稻瘟病菌和大肠杆菌样品没有交叉反应,所制备的抗体具有Xoo特异性。本研究建立了检测Xoo的WB技术,检测下限约为3500个Xoo细胞,并且WB信号与Xoo的量在一定范围内有线性关系。水稻接种Xoo菌后5-7天表型可见水稻感病,在本实验中,用WB方法检测Xoo,在人工接种Xoo后第一天,即可检测到水稻中的Xoo,在接种后第2天,即可检测到抗感反应中Xoo数量的显著区别。在水稻-Xoo不亲和反应中,接种后10天,Xoo仅存在于接种部位附近(6cm)的范围内,在水稻-Xoo亲和反应中,接种后10天,可在接种部位12cm范围内检测到Xoo,而在距离接种部位更远的叶片和非接种叶片中,均不能检测到Xoo信号,说明抗病水稻品种对Xoo的繁殖具有更强的抑制作用。  免疫学技术为检测Xoo在水稻中的繁殖提供了一个新的选择,本文建立的免疫印迹方法,操作可在一天内完成,可望替代实验室常用的剪叶计数方法,为鉴定水稻受Xoo的侵染以及水稻-Xoo互作研究提供了有应用价值的方法。
其他文献
  本文对兴平市农产品质量安全的现状和发展趋势进行了分析,对工作中存在的问题进行了梳理,提出了加强职业农民培育,促使农产品生产向标准化发展;加快培育优质农产品,促进农民增
  本文介绍了美国、欧盟等国外发达国家和地区,在农产品质量安全管理中积累的丰富经验。了解到其表现在法律体系健全完善,严明执法;管理机构分工明确,各司其职;管理技术手段科学
  "民以食为天,食以安为先",农产品质量安全关系到人民群众的身体健康和生命安全,加强农产品质量安全工作,保障生产和消费安全,实现农产品"从农田到餐桌"的安全显得尤为重要。本
凋落物是森林生态系统中重要的组成部分,是森林地表的一个重要覆盖面。凋落物可以缓冲降水势能,吸收地表水,使地表径流转变为流速缓慢的层间流和层下流,它对改善土壤结构具有
本论文从水资源调配系统的输入、输出以及系统内部结构组成等三个方面出发,分别就各子系统的主观的和客观的不确定性来源,进行了分析和描述,并借助随机过程概念、概率论数学理论
  随着我国经济社会的快速发展和人民生活水平的不断提高,人们对农产品质量安全的关注度越来越高,农产品安全生产成为人民群众最关心、最直接、最现实的民生问题。本文通过对
全国艺术学学会艺术管理委员会于2014年12月在云南艺术学院召开了第三届年会,年会主要围绕"全球化语境下的艺术管理"进行深入研讨.全球化并非意味着对世界其他国家艺术管理基
高速公路、水利水电、矿山开采等基础设施的大量修建,所形成的永久或临时性边坡历来都是岩土工程的核心问题,针对其中类土质岩体形成的弱黏结边坡,以三峡水库为背景,采用离散
  "国以民为安,民以食为天,食以安为先。"农产品质量安全事关人民群众身体健康,事关社会和谐稳定。保障农产品质量安全是我国新形势下农业发展的重要目标和任务,也是党在农村政
随着现代化进程的发展以及社会经济的进步,非物质文化遗产的传承面临着严峻的挑战,如何对非物质文化遗产进行全方位保护是当下面临的严峻考验.本文以济南市非物质文化遗产为