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当今社会农作物的产量和品质随着科学技术的进步而得到了提高,但是化学农药的使用量随之增加,致使生态环境失衡和食品安全问题成为了人们高度关注的焦点。因此,研发出环境友好型的绿色农药是目前亟待解决的问题。本课题的出发点是,通过筛选获得较高生物活性的菌株并进行大规模发酵,对其次级代谢产物进行分离纯化,得到具有良好生物活性的单体化合物,为新型绿色农药的研发提供新颖的结构模型和研究思路。本研究用4种营养成分不同的培养基(RICE、PDB、MH1和GPYM培养基)优化培养8株分别来源于海洋、土壤、植物的真菌进行优化培养,通过生产力、产物丰富度、抑菌活性等筛选实验,发现来源于土壤的菌株AAM-1的RICE培养基发酵的次级代谢产物丰富且生物活性较好,因此选择用较优RICE培养基对菌株AAM-1进行规模发酵。经分子生物学菌种鉴定,菌株AAM-1为赭曲霉(Aspergillus ochraceus)。将菌株AAM-1大规模发酵4周,将所得的代谢产物用VLC梯度洗脱的方式分成18个粗组分,使用活性追踪的方法对Fr.1-Fr.18粗组分进行分离纯化。在粗组分的抑菌活性实验中,发现组分Fr.4、Fr.6、Fr.8-Fr.16的生物活性较好,使用硅胶柱、凝胶柱、反相柱等柱层析技术、p TLC等各种现代分离纯化技术做进一步的提纯,共得到70余个单体化合物。使用滤纸片和最小抑制浓度两种模式进行生物活性筛选,对36个质量较大的化合物进行抑菌活性筛选实验以及红线虫致死实验,实验发现单体化合物中多数对细菌具有较好的抑制活性,其中L-4、L-27、L-28、L-41和L-45对细菌具有广谱抑制性,对6株供试菌株的抑菌圈直径均大于15mm;其他抑菌活性较强的单体化合物有:L-69,对菌株EC具有强选择性,抑菌圈直径达到32mm(阳性对照为30 mm);L-74,对菌株BT具有强选择性,抑菌圈直径达到26mm(阳性对照为32 mm);L-48,对SA抑制作用最强,抑菌圈直径达到22mm(阳性对照为36 mm);L-23,对XC抑制作用最强,抑菌圈直径达到23mm(阳性对照为35 mm);L-10,对BS抑制作用最强,抑菌圈直径达到32mm(阳性对照为36 mm)。另外,AAM-1的次级代谢产物对红线虫的致死作用很强,其中L-74、L-77和L-68对红线虫的致死毒性最强,L-74浓度为0.073 mg/ml时可以使红线虫在6h内半数死亡,浓度为0.150 mg/ml时可以使红线虫在4h内半数死亡;L-77浓度为0.095 mg/ml时可以使红线虫在6h内半数死亡,浓度为0.157 mg/ml时可以使红线虫在4h内半数死亡;L-68的8h LC50值小于0.1 mg/ml,毒性次之,浓度为0.089 mg/ml时可以使红线虫在8h内半数死亡,浓度为0.136 mg/ml时可以使红线虫在6h内半数死亡。综合考虑单体化合物的细菌抑制性和红线虫致死毒性得出,L-7、L-10、L-69、L-74、L-77不仅具有较强的抑菌活性,同时也有较强的红线虫致死毒性,在生物活性方面表现优异,在后续实验中可以作为重点研究对象。