康复新液对肾纤维化大鼠TGFβ/Smads信号通路影响的实验研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wangrong2000
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目的:1.单侧输尿管结扎术后,观察大鼠肾脏病理、血清中肾功能指标变化,检测大鼠肾纤维化模型是否复制成功。2.康复新液给药肾纤维化模型大鼠后,观察肾脏病理、血清中肾功能指标变化及免疫组化中TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白表达变化,探索康复新液对大鼠肾纤维化模型的治疗效果及可能作用机制,为临床治疗肾纤维化提供新思路。方法:选健康SD大鼠108只,雌雄各半,体重200±20g,随机分六组:假手术组,模型组,康复新液低、中、高剂量组,贝那普利组,每组18只。每18只大鼠又均分为7d、14d、21d组。除假手术组外,均采用UUO模型(即麻醉后打开腹腔,结扎左侧输尿管),假手术组大鼠打开腹腔后分离左侧输尿管但不结扎,随即关闭腹腔。各组均于造模后第二天灌胃,康复新液低、中、高剂量组予等剂量不同浓度的康复新液,贝那普利组予等剂量的贝那普利,假手术组,模型组予等剂量的生理盐水,每天一次,分别灌胃7d、14d、21d。分批处死并收集腹主动脉血和肾脏组织标本,制备血清,检测血清Scr、BUN、β2-MG;取肾组织,HE和Masson染色观察左侧肾组织病理变化;免疫组织化学染色检测大鼠肾组织TGF-β1、Smad3、Smad7的表达。结果:(1)肾组织病理改变:假手术组未见病理改变。模型组、康复新低剂量组可见肾小管扩张,肾间质纤维化,肾小球纤维增生,余治疗组较模型组减轻,随时间延长,模型组加重,各治疗组均有所减轻;⑵肾功能指标:不同时间段假手术组Scr、BUN、β2-MG与其余各组相比(P<0.05),差异有统计学意义;康复新液中、高剂量组,贝那普利组与模型组相比有下降(P<0.05),差异有统计学意义;康复新低剂量组与模型组相比(P>0.05),差异无统计学意义;康复新液中、高剂量组与贝那普利组相比(P>0.05),差异无统计学意义。随着时间延长,各组未见明显差异。(3)肾组织中TGF-β1、Smad3、Smad7表达:不同时间段假手术组与其余各组相比,肾组织中的TGF-β1、smad3蛋白表达降低,smad7蛋白表达升高(P<0.05),差异有统计学意义;康复新液中、高剂量及贝那普利组与模型组相比,TGF-β1、smad3蛋白表达降低,smad7蛋白表达升高(P<0.05),差异有统计学意义;模型组与康复新液低剂量组相比(P>0.05),差异无统计学意义;康复新液中、高剂量组与贝那普利组相比(P>0.05),差异无统计学意义。随着时间延长,各组未见明显差异。结论:(1)康复新液对模型大鼠肾功能、病理等指标具有明显改善作用,提示其具有一定保护肾功能和抗肾纤维化作用,此作用呈量效关系,以康复新液中、高剂量组效果更明显,但并未显示一定的时效关系。(2)康复新液抗肾纤维化作用机制可能是通过抑制大鼠肾组织TGF-β1和Smad3表达,促进Smad7表达,影响TGF-β/Smads信号传导通路,达到延缓肾脏纤维化目的。
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