蜜蜂球囊菌胞外蛋白酶的种类及其特性研究

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蜜蜂白垩病(Bee chalkbrood disease)是由蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)引起的真菌性传染病,其对蜜蜂幼虫的成功侵染依赖于所分泌各种胞外的蛋白酶。本研究中,我们对福建农林大学蜂学学院蜜蜂生理病理实验室自行分离和保藏的编号为ND-2的蜜蜂球囊菌菌株分泌的胞外蛋白酶,进行了几丁质诱导,诱导产物经过85%硫酸铵盐析,4℃10000 rpm 30 min离心,用双重蒸馏水透析袋透析24小时去盐离子后制备成球囊菌胞外酶粗酶液。经检验,蜜蜂球囊菌诱导分泌的该胞外蛋白酶液中含有酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶和胶原蛋白酶。进而,我们对这几种胞外酶的特性进行了研究,发现酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶的最高反应温度分别为45℃、50℃、50℃;最高反应pH分别为7、6、8;Mn2+对酪蛋白酶具有激活作用,而其他的离子则具有一定的抑制作用。Mn2+、Zn2+、Ca2+、Fe2+、Mg2+、Al3+对偶氮酪蛋白酶都有一定的抑制作用,其中Zn2+、Fe2+抑制作用明显。Mn2+、Al3+对胶原蛋白酶具有激活作用,而Zn2+、Ca2+、Fe2+、Mg2+对其具有抑制作用,其中Zn2+具有严重的抑制作用。
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