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目的：先天性甲状腺功能减退症(congenital hypothyroidism，CH)或克汀病是常见的儿童内分泌疾病，脑是甲状腺激素作用的主要靶器官，CH对患儿的危害主要是脑发育异常致患儿智力低下。目前有关CH致脑发育障碍机制尚不清楚。本研究拟通过建立CH大鼠动物模型，利用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组化技术旨在动态研究塌陷反应调节蛋白2B(collapsing response mediator protein2B，CRMP2B)和肌动蛋白相关蛋白2/3复合物第5亚单位(actin related protein2/3 complex subunit5，ARPC5)在CH大鼠大脑皮质差异表达及与CH发病相关性。 方法：于孕鼠E15开始实验组每日经胃灌注1％丙基硫氧嘧啶2.5ml，所生即为甲减仔鼠，对照组每日经胃灌注生理盐水2.5ml。仔鼠出生后孕鼠持续灌胃至产后15d。分别于P1、P15处死仔鼠，放射免疫分析法检测血清FT3、FT4、TSH水平，同时取右侧大脑皮质分别用实时荧光定量PCR、Western blot方法检测CRMP2B和ARPC5基因和蛋白表达差异，左侧大脑半球用4％甲醛固定，石蜡包埋。用免疫组化技术进行CRMP2B和ARPC5蛋白定位检测。各时间组取仔鼠8只。 结果：⑴CH大鼠动物模型建立：甲减仔鼠与正常仔鼠相比，甲减组的仔鼠死亡率比较高，可达50％(16/32)，出生后体形较小，体重增长比较慢，尾巴较短，毛发稀疏并且萌出较晚，开眼比较晚，断乳也较晚，反应迟钝且平衡能力较差。甲减组的仔鼠体重低于正常组(tp1=-8.074，tp15=-7.891，P<0.01)，血清FT3水平低于正常组(tp1=-5.386，tp15=-6.624，P<0.01)，血清FT4水平低于正常组(tp1=-7.618，tp15=-12.806，P<0.01)，血清TSH水平高于正常组(tp1=-9.789、tp15=-11.448，P<0.01)。⑵CH大鼠大脑皮质CRMP2B和ARPC5mRNA表达差异：P1时，与正常组相比，CH组CRMP2B和ARPC5mRNA表达差异无统计学意义。(Pcrmp2=0.96，Parpc5=0.268)。从P1到P15，CRMP2B和ARPC5mRNA表达水平在正常组和CH组均升高，但CH组表达水平低于正常组(Pcrmp2=0.008，Parpc5<0.001)。⑶CRMP2B(64kD)蛋白差异表达：P1时，CRMP2B(64kD)在正常组与实验组大鼠大脑皮质表达差异无统计学意义(P=-0.319)，P15时，正常组大鼠大脑皮质CRMP2B(64kD)表达量高于实验组(P=-0.004)。在正常大鼠大脑皮质发育过程(从P1到P15)，CRMP2B(64kD)表达升高(P<0.001)而在CH大鼠CRMP2B(64kD)表达差异无统计学意义(P=0.342)。CRMP2B(58kD)蛋白差异表达：P1时，CRMP2B(58kD)在正常组与实验组大鼠大脑皮质表达差异无统计学意义(P=-0.508)，P15时，正常组大鼠大脑皮质CRMP2B(58kD)表达量低于实验组(P<0.001)。在正常大鼠大脑皮质发育过程(从P1到P15)，CRMP2B(58kD)表达下调(P=-0.017)而在CH大鼠CRMP2B(58kD)表达上调(P<0.001)。⑷ARPC5蛋白差异表达：P1时，ARPC5在正常组与实验组大鼠大脑皮质表达差异无统计学意义(P=-0.538)，P15时正常组大鼠大脑皮质ARPC5表达量高于实验组(P<0.001)。在正常和CH大鼠大脑皮质发育过程(从P1到P15)，ARPC5表达均升高(P正常<0.001，PCH<0.001)。⑸CRMP2B蛋白定位表达研究：P1时，CRMP2B阳性细胞散在分布，CRMP2B表达于神经元胞体和突起，正常组与CH组表达强度差异无统计学意义(Z=-0.968，P=0.333)。P15时，CRMP2B在大脑皮质6层弥漫分布，表达强度增强，CRMP2B表达于神经元细胞核、胞体和突起，CRMP2B表达强度在正常组高于CH组(Z=-2.031，P=0.042)，但核阳性细胞率在CH组高于正常组(t=19.359，P<0.001)，CH组CRMP2B细胞核阳性表达细胞突起形成短小，排列紊乱。⑹ARPC5蛋白定位表达研究：ARPC5弥漫表达于大脑皮质6层结构，主要表达于神经元突起，P1时，正常组与CH组表达强度差异无统计学意义(Z=-0.522，P=0.602)，P15时，表达强度增高但CH组表达强度低于正常组(Z=-2.450，P=-0.014)。 结论：神经系统的功能发挥有赖于复杂神经网络的建立，复杂神经网络是由无数个神经元突起包括轴突和树突构建的，正确的轴突发生和树突形成保证了中枢神经系统的正常发育成熟，神经突起的发育异常必将导致脑发育障碍。在本研究中，我们首次报道了在CH大鼠大脑皮质发育过程中，CRMP2B(58kD)表达增高且核转移率增高，相反，CRMP2B(64kD)和ARPC5则表达下调。上述三种蛋白协同作用通过抑制神经元突起延伸、生长锥塌陷形成异常、细胞骨架蛋白重组异常等多个环节导致CH中枢神经系统发育异常。研究结果为探讨CH致脑发育异常提供了新的线索。