【摘 要】
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针对目前香菇多糖生产成本高、产量小、价格昂贵的生产现状,本研究采用紫外线辐射诱变与杂交育种相结合的育种手段选育香菇多糖高产菌株,利用拮抗试验、酯酶同工酶电泳试验筛
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针对目前香菇多糖生产成本高、产量小、价格昂贵的生产现状,本研究采用紫外线辐射诱变与杂交育种相结合的育种手段选育香菇多糖高产菌株,利用拮抗试验、酯酶同工酶电泳试验筛选出发生突变的香菇单核体杂交组合,并探讨了这些方法在香菇育种领域中的应用。1.选取国内不同地域香菇主栽品种9个,测定各品种的菌丝多糖含量,确定Cr-04,L-26为出发菌株,通过单孢分离、紫外线诱变、单孢杂交,共获得204个具有锁状联合的杂交菌株。2.淘汰菌丝生长过慢或菌丝微弱的杂交组合,将其它组合与其本进行拮抗试验,其中有50个杂交菌株与其亲本菌丝融合生长,没有产生拮抗线;另有56个菌株只与亲本产生微弱拮抗;98个杂交菌株菌丝与其亲本有明显的拮抗线,说明不是同种菌丝,获得的是杂交新组合。3.通过对98个杂交菌株进行菌丝生长状况比较分析,获得X19,X29,X37,X42,X48,X51,X77,X86,X92,X98,X116,X134,X153,X159,X167,X175,X185,X189,X239,X246,X259,X280,X301,X345,X350,X357,X356,X368,X382,X386,X432,X470,X480,X487,X525,X541,X583等37个菌丝表现为洁白浓密,菌丝生长旺盛并菌落边缘整齐的杂交菌株。4.通过对杂交菌株菌丝多糖含量的比较及多糖含量稳定性分析,获得X19,X29,X42,X77,X185,X246,X525等7个多糖含量明显高于亲本Cr-04,L-26的富多糖杂交菌株。分别在培养9,10,11,12,13天时测定7个杂交组合的多糖含量,获得多糖产量高峰期为第11天。采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳方法,对杂交亲本与7个富多糖杂交组合一同进行酯酶同工酶分析,结果表明杂交新菌株具有“杂种新酶带”和“互补型酶带”,进一步验证此7个菌株为优良变异菌株。5.通过碳源、氮源及不同碳、氮浓度对香菇菌丝生物量及多糖产量影响的研究,香菇产多糖最佳碳源为淀粉,最佳浓度为6%;最佳氮源为酵母膏,最佳浓度为0.4%.
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