【摘 要】
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从昆明市郊小麦、大麦、蚕豆等农作物的根际土及香荚兰各种植区土壤分离到约60株芽孢杆菌和100余株荧光假单胞杆菌,对香荚兰根腐病病原菌有不同程度的拮抗作用, 其中作用较强
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从昆明市郊小麦、大麦、蚕豆等农作物的根际土及香荚兰各种植区土壤分离到约60株芽孢杆菌和100余株荧光假单胞杆菌,对香荚兰根腐病病原菌有不同程度的拮抗作用, 其中作用较强的芽孢杆菌占分民杆菌总量的90.4﹪,作用较强的荧光假单胞杆菌占分离荧光假单胞杆菌总量的50.5﹪.从中筛选出荧光假单胞杆菌P5菌株对小麦全蚀病菌棉花立枯病菌和烟草赤星病菌都有一定程度的拮抗性.通过抗性压力筛选获得利福平200ug/ml的P5菌株.从质粒pUC1965得到6.5kb的几丁质酶基因.将该基因与大肠杆菌-荧光假单胞杆菌穿梭质粒pDSD519连接,获得重组质粒pDSK5195,用化学方法转化大肠杆菌DH5α,在含Kan,X-gal和IPTG的平板上检测出具白色菌落的重组子,经几丁质平筛选,得到产生几丁质消解圈的阳性克隆子.煮沸的方法从大肠杆菌中重提组质粒,酶切验证能产生6.5kb的片段. 室内拮抗试验表明,P5-1对小麦全蚀病菌、水稻纹枯病菌和棉花立枯病菌的拮抗性比野生菌株相比都有所提高.温室盆栽试验结果表明用P5和P5-1处理小麦和棉花种子或进行叶面喷雾,对小麦全蚀病、水稻纹枯病和棉花立枯病的防效分别为49.9﹪、47.6和31.0﹪,与野生型菌株P5相比分别提高了12.3﹪,14.7﹪和11.1﹪,但在统计学上无著性差异.
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