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目的1建立一种检测人血清载脂蛋白M(apolipoprotein M,apoM)的双抗体夹心ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)法。运用该方法检测健康人群血清apoM浓度,并建立apoM的正常参考值范围。2.应用该方法检测2型糖尿病患者血清apoM浓度,初步探讨apoM在2型糖尿病患者血清中的变化趋势,以便进一步了解apoM对2型糖尿病并发动脉粥样硬化相关疾病的作用。方法1.用抗apoM单克隆抗体作包被抗体,辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)标记的抗apo M单克隆抗体作酶标记抗体,建立检测apoM的双抗体夹心ELISA法,并通过一系列方法学试验对该方法进行评价。2.测定483例健康人群血清apoM浓度,建立apoM的正常参考值范围。3.用该方法检测117例2型糖尿病患者和111例对照组血清apoM浓度,比较两组血清apoM、超敏C反应蛋白(high sensitivity C reactive protein,hs-CRP)、血脂水平,分析两组血清apoM水平和各项指标的相关性。结果1.本ELISA法检测人血清apoM的线性范围为31.25ng/mL～500ng/mL;最低检测限为23.92ng/mL;脂蛋白(a) (Lp(a))、载脂蛋白A1 (apolipoproteinAI, apo Al)和载脂蛋白B(apolipoprotein B,apo B)对apo M检测结果干扰作用小；批内、批间变异均<10%。2.apoM女性正常参考值为22.55±11.60μg/mL,男性正常参考值为21.44±12.71μg/mL,健康人群的正常参考值范围为22.06±12.10μg/mL;健康人群血清apoM水平与甘油三酯(total triglycerides, TG)呈负相关(r=-0.186,p<0.05),但与总胆固醇(total cholesterol, TC)(r=0.106,p<0.05)和高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C) (r=0.395,p<0.01)呈正相关,差异有统计学意义。3.2型糖尿病患者血清apoM水平(23.36±13.55μg/mL)低于对照组(26.86±10.40μg/mL),差异有统计学意义(p<0.05)；糖尿病组血清apoM水平与TC呈正相关(r=0.235,p<0.05),与HDL-C呈正相关(r=0.183,p<0.05),与hs-CRP呈负相关(r=-0.185,p<0.05)。结论1.本研究建立了一种定量检测人血清apoM浓度的双抗体夹心ELISA法,该方法具有较好的敏感性和特异性；确定了该方法检测人血清apoM浓度的正常参考值范围。2.2型糖尿病患者血清apoM浓度降低；apoM水平与TC、HDL-C呈正相关,与hs-CRP呈负相关,提示apoM可能参与体内胆固醇、HDL代谢,可能参与体内炎症反应,抑制hs-CRP等炎症因子的释放,发挥抗动脉粥样硬化的作用；进一步提示2型糖尿病患者血清apoM浓度降低对其并发动脉粥样硬化疾病可能有预示作用。