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[目 的]薯蓣皂苷(Dioscin,Dio)是薯蓣科植物中提取出来的一种天然甾体皂苷类化合物,具有改善心血管功能、保护肝脏功能、调节机体免疫、抗血小板聚集、降低血脂等多种药理作用。近年来发现,薯蓣皂苷还具有很强的抗肿瘤活性,但其作用机制尚未明确。内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)普遍存在于肿瘤细胞中,在应激条件下如何维持新生肽链的折叠,是肿瘤细胞增殖和抗凋亡的关键因素。本课题研究Dio对结肠癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响,并探讨其可能的作用机制。[方法]1.选取现有的结肠癌细胞HT29、RKO、HCT116、SW480和SW620,设置对照组和药物处理组,用培养基将薯蓣皂苷按照预设的浓度梯度分别稀释后加入各组细胞,MTT法检测各组细胞在各浓度药物作用时的细胞系相对存活率,并用SPSS计算Dio对各组细胞的半数抑制浓度(IC50)。2.选取对薯蓣皂苷最敏感的两株结肠癌细胞株,用预设Dio浓度梯度处理细胞48h后,用流式细胞术检测其细胞周期。3.用预设Dio浓度梯度处理细胞48h和用IC50药物浓度处理细胞Oh、12h、24h、48h后,用流式细胞术检测细胞凋亡。4.用预设Dio浓度处理细胞48h,用划痕实验检测细胞迁移的情况。5.用预设Dio浓度处理细胞48h,用Western Bolt来检测内质网应激相关分子 PERK、IRE1α、ATF6、caspase12,线粒体途径相关分子 Cytochrome C、caspase9及凋亡分子caspase3和Cleaced-caspase3的表达。[结 果]1.结肠癌细胞HT29、RKO、HCT116、SW480和SW620均随着药物浓度的增加及药物处理时间的延长表现出不同程度的细胞抑制效果,Dio作用各细胞株48h 的 IC50分别为:HT29(2.27±0.16)μg/mL、RKO(9.46±0.23)μg/mL、HCT116(1.19±0.24)μg/mL、SW480(2.08±0.18)μg/mL 和 SW620(1.26±0.25)μg/m L,其中HCT116和SW620对药物最为敏感,其IC50值最小。2.流式细胞仪结果显示,对照组、0.5μg/mL和1.Oμg/mL薯蓣皂苷处理48h后,HCT116细胞的S期细胞比例分别为(29.58±0.05)%、(33.96±0.05)%和(38.78±0.02)%,(P<0.05);细胞凋亡率分别为(0.05±0.00)%、(21.32±0.10)%和(45.97±0.07)%,(P<0.05)。SW620 细胞的 S 期细胞比例分别为(38.47±0.05)%、(43.77±0.05)%和(56.92±0.05)%,(P<0.05);细胞凋亡率分别为(0.02±0.01)%、(1.17±0.03)%和(5.2±0.04)%,(P<0.05)。3.1.0μg/mL薯蓣皂苷处理0h、12h、24h、48h后,HCT116细胞的凋亡比率分别为(0.04±0.01)%,(1.59±0.10)%、(3.25±0.03)%、(14.92±0.20)%,(P<0.05);SW620 细胞的凋亡比率分别为(0.10±0.01)%,(3.98±0.16)%、(5.14±0.03)%、(11.31±0.11)%,(P<0.05)。4.划痕实验结果显示,在HCT116细胞中对照组迁移率为(0.37±0.00)%,实验组迁移率为(0.07±0.00)%,(P<0.05);在SW620细胞中对照组迁移率为(0.32±0.01)%,实验组迁移率为(0.08±0.00)%,(P<0.05)。5.Western Bolt结果显示,与对照组相比,药物处理组中内质网应激相关分子(PERK、IRE1α、ATF6、caspase12)均高表达P<0.05)。6.与对照组相比,药物处理组中线粒体途径相关分子(CytC、caspase9)均高表达(P<0.05)。7.与对照组相比,药物处理组中凋亡分子(caspase3、Cleaved-caspase3)均高表达(P<0.05)。[结论]1.薯蓣皂苷可显著抑制结肠癌细胞增殖和迁移,促进其凋亡。2.薯蓣皂苷可诱导激活内质网应激反应的发生,并通过线粒体凋亡途径介导结肠癌细胞凋亡。