论文部分内容阅读
从南京紫金山林下枯落物中分离出了15种形态不同的菌株。随后用3种类型共6种染料(包括偶氮类染料刚果红(单偶氮)和橙黄G(双偶氮)、三苯甲烷类染料结晶紫和酸性品红、醌亚胺类染料中性红和番红花红T)对这15株菌进行筛选。首先使用固体染料培养基初筛，筛选出一株脱色效果较强的菌株，能够使这6种染料全部脱色，经分子鉴定为白腐菌，菌株命名为Ceriporiopsis sp.S12-2。随后，用液体染料培养基(包括刚果红、橙黄G和酸性品红)对此菌作进一步脱色能力测定，发现Ceriporiopsis Sp.S12-2可以使3种染料在48h内脱色率都达到90％以上。最后测定了该菌的酶活性，确定引起脱色的关键酶是锰过氧化物酶(MnP)。
同时，作者还筛选出一株脱色能力也比较强的白腐真菌Trametes sp.，脱色能力比Ceriporiopsis sp.S12-2弱。对该菌酶活进行测定时，发现漆酶(Lac)的活性很强。作者用测量漆酶常用的3种底物2，2’-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(简称ABTS)、邻联茴香胺和愈创木酚来检测酶活，结果表明，ABTS测出的漆酶活性远远高于其它底物。因此，ABTS的敏感度最好，是较理想的测定漆酶的底物。
Ceriporiopsis sp.S12-2和Trametes sp.是从同一环境中分离出来的两种白腐真菌，难免会发生相互作用。在固体培养基上混合培养的实验中，Ceriporiopsis sp.S12-2生长快于Trametes sp.，可以抑制Trametes sp.的生长，并伴随深褐色真菌色素的分泌。Ceriporiopsis sp.S12-2最终可以覆盖并取代Trametes sp.的大部分菌丝体表面。在液体培养基混合培养实验中，单独培养的Ceriporiopsis sp.S12-2产生MnP，单独培养的Trametes sp.产生Lac，而混合培养的样品中，MnP和Lac的值都有所降低，且菌丝生长量也受到抑制。这些可能与真菌分泌出的酶有关。
两种白腐真菌Ceriporiopsis sp.S12-2和Trametes sp.都有较强的脱色能力，当这两种菌混合对染料进行脱色时，作者发现在固体染料培养基上，Ceriporiopsissp.S12-2脱色作用增强，而Trametes sp.减弱。同时染料降低了Ceriporiopsis sp.S12-2的竞争能力，仅能覆盖并替代一小部分的Trametes sp.菌丝体表面。在液体条件下，混合菌脱色能力反而低于Ceriporiopsis sp.S12-2单独作用，但高于Trametes sp.单独作用。这可能与两种菌相互作用下酶活性产生变化有关。